孕期尼古丁暴露对大鼠成年子代学习记忆能力的影响及其机制的研究.pdfVIP

孕期尼古丁暴露对大鼠成年子代学习记忆能力的影响及其机制 摘 要 孕期尼古丁暴露对大鼠成年子代学习记忆能力 的影响及其机制 摘 要 第一部分 孕期尼古丁对大鼠子代脑发育的影响 1.1 目的：研究孕期母鼠暴露于尼古丁对胎鼠及成年子代脑发育的影响。 1.2 方法：将妊娠母鼠随机分为对照组和尼古丁组，每组 16 只；两组分别于妊 娠第四天（GD4 ）, 4%水合氯醛麻醉后，于大鼠颈背部置入微量缓释泵。尼古丁组置 入每天以 6mg/kg 速度释放尼古丁的微量缓释泵, 对照组置入装有生理盐水的微量缓 释泵。两组各取8 只孕鼠，在GD21 时用4%水合氯醛麻醉，取出胎鼠称量体重后， 暴露胸腔心脏穿刺收集胎鼠血液，然后断头取脑，称量大脑重量。使用血气分析仪检 测胎鼠血气指标及电解质水平；用渗透压仪检测血浆渗透压。两组剩余孕鼠自然分娩， 子代标准化饲养至成年（五个月），用4%水合氯醛麻醉，称量其体重；腹主动脉取血 后断头取脑，称量大脑重量。用血气分析仪检测成年子代血气指标及电解质水平；用 渗透压仪检测血浆渗透压。 1.3 结果：尼古丁组 GD21 胎鼠的体重及大脑重量与对照组相比显著下降（P ＜ 0.05 ）；尼古丁组胎鼠血液中血氧分压、血氧饱和度明显降低（P ＜0.05 ），血二氧化碳 分压、血红蛋白含量明显升高（P ＜0.05 ）, 血浆渗透压、血钠水平、血钾水平没有显 著差异（P ＞0.05 ）。检测尼古丁组成年子代大鼠上述指标与对照组相比没有显著差异 （P ＞0.05 ）。结论：孕期尼古丁暴露对GD21 胎鼠脑发育及血气指标产生了一定影响。 关键词：尼古丁；子代；脑发育 第二部分 孕期尼古丁对大鼠成年子代学习记忆的影响 2.1 目的：研究孕期尼古丁对大鼠成年子代学习记忆的影响及其机制。 I 摘 要 孕期尼古丁暴露对大鼠成年子代学习记忆能力的影响及其机制 2.2 方法：将妊娠母鼠随机分成对照组和尼古丁组，建模方法同第一部分。两组 大鼠自然分娩后，子代标准化饲养至成年（五个月）用于实验。1) 用Morris 水迷宫 方法，观察对照组、尼古丁组的大鼠成年子代学习记忆能力；2) 用 Real-Time PCR 方法检测两组大鼠成年子代海马脑区N- 甲基-D-天门冬氨酸受体的1 型亚基（NR1 ）、 α 型烟碱型乙酰胆碱受体（α nAChR ）基因的表达；3 ）使用Western blot 方法检测其 7 7 成年子代大鼠海马脑区NR1 、α nAChR 、毒蕈碱受体（M ）蛋白的表达。 7 2.3 结果：1）尼古丁组成年子代的学习记忆能力与对照组相比显著下降（P ＜ 0.05 ）；2) 尼古丁组成年子代大鼠海马脑区NR1 基因表达与对照组相比明显升高（P ＜0.05 ），α nAChR 基因表达与对照组相比无明显差异（P ＞0.05 ）；3 ）尼古丁组成年 7 子代大鼠海马脑区NR1 蛋白表达与对照组相比明显升高（P ＜0.05 ），α nAChR 蛋白 7 表达与对照组相比明显下降（P ＜0.05 ）； M 1、M3、M5 受体蛋白表达与对照组相比 无明显差异（P ＞0.05 ）。结论:孕期尼古丁组大鼠成年子代学习记忆能力与对照组相比 显著下降；且尼古丁组成年子代大鼠海马脑区NR1 基因和蛋白的表达量显著升高； α nACh 受体基因表达无明显差异，α nACh 受体蛋白表达显著下降； M 1、M3、M5 7 7 受体蛋白表达与对照组相比无显著差异，提示孕期尼古丁暴露可能导致大鼠成年子代 海马区NMDA 受体和胆碱能相关受体基因和蛋白的表达发生改变并与成年子代学习 记忆能力受损有一定相关性。 关键词：