人巨细胞病毒miR-UL70-1-5p靶基因筛选与鉴定.pdf

·中文论著摘要· i 人巨细胞病毒mR-UL70-1-5p靶基因的 筛选与鉴定 目的 人巨细胞病毒(human 是引起新生儿疾病和先天畸形的重要感染因素之一，但HCMV先天感染的致病机 能的研究少有文献报道，而且最近有学者对其表达与否存在质疑。本研究拟采用 PCR，荧光素酶报告基因表达检测实验和免疫印迹实 实时荧光定量PCR，hybrid 验(western 控作用。 材料和方法 一、实验材料 标本为中国医科大学附属盛京医院病毒研究室保存的临床低传代分离株Han 株；所用试剂为涉及反转录、RNA提取、PCR扩增、基因重组、荧光素酶报告基 因检测、免疫印迹等实验的相关试剂盒；常用实验设备包括Beckman台式低温高 速离心机、Bio．radPCR循环仪、细胞培养箱和荧光检测设备等：常用数据库及分 析软件包括基因组数据库、凝胶成像及扫描分析软件、引物设计软件等。 二、实验方法 l、采用实时荧光定量PCR的方法检测HCMV感染人胚