1中国孤雌生殖卤虫十个地理品系的DNA指纹分析与进化.pdfVIP

中文摘要 (Artemia)。卤虫广泛分布于内陆盐湖和海岸盐田中，是一个广温广布种。我国对于卤 虫的研究起步较晚，从80年代初至今在形态学(黄鸣夏等1980，蔡生力等1989，蔡亚能 r 科的卤虫研究已有报道。但，关于中国卤虫种群，尤其是中国孤雌生殖卤虫种群的分类学、 分子群体遗传学的研究工作报道的较少，还有待于进～步深入细致的研究和分析。分子标 记技术的飞速发展和逐步完善，为上述研究的顺利进行，提供了更有力、更有效的手段。 因此，本文应用RAPD及ISSR两种分子生物学方法对中国孤雌生殖卤虫十个地理品系的 DNA指纹进行分析与鉴定。对等位基因和基因座位在孤雌生殖卤虫种群中的数量和分布情 况、孤雌生殖卤虫种群各品系间的遗传相似系数和遗传距离、备品系遗传相似系数的聚类 分析、卤虫各品系基因组DNA的多态组成等内容进行了较深入的研究。 采用优化后的随机扩增多态DNA(RandomAmplifledPolymorphicDNA，简称RAPD) 技术，用经筛选的40个lObp随机引物对中国孤雌生殖卤虫十个地理品系的基因组DNA 进行扩增，以期从分子水平上了解十个不同地区的孤雌生殖卤虫的遗传结构，比较它们之 闻的遗传差异。在扩增出的422条多态片段中，其中371条(8791％)表现为多态，平均 每个引物扩增出lo．55个位点。以遗传相似系数所作的聚类分析图可以把中国孤雌生殖卤 虫分为三个主要类群：I．新疆巴里坤、青岛尕海卤虫品系：2．新疆艾比湖卤虫品系：3 辽宁、山东、河北卤虫品系。 ISSR(inter simplesequencerepeats)也称锚定简单重复序列(anchored simple sequence 加上2—4个随机核苷酸，从而保证了引物与基因组DNA中SSR的5’和3’末端结合通 l 过PCR反应扩增SSR之间的DNA片段。SSR在真核生物中的分布是非常普遍的，并且 进化变异速度非常快，因而锚定引物的ISSRPCR可以检测到基因组许多位点的差异。 它继承了PCR技术的商效率、DNA样品用量少、特异性强和检测方便等优点，并具有 SSR的稳定性，与RAPD技术相比，有明确的针对性、更高的多态性。本研究运用合成 76％) 表现为多态，平均每个引物扩增出12．14个位点，具有较强的多态’肚。ISSR以其简便快 捷的特点已开始应用于动植物指纹图谱分析及遗传多样性的研究。 [SSR 关键词 中国孤雌生殖卤虫十个地理品系系统学RAPD 2 l-前言 材料已被广泛应用于水生生物学、发育生物学、遗传学、生理学、毒理学、放射生物学和 分子生物学的研究(第一届、第二届国际卤虫会议论文集1980，1987)。同时，卤虫为水 产养殖中的一种重要的饵料生物，被养殖的海洋动物有85％需投喂卤虫。卤虫的应用，使 水产育苗工作取得了突飞猛进的进展，我国对卤虫的研究工作起步较晚，随着养殖业的发 展，对卤虫的形态学(黄鸣夏等1980…，蔡生力等1989”1，蔡亚能等1986。3’．侯林1998“】)、 3．贾沁贤等1995”1)、资源生 发育生物学(廖承义等1993”J)、生态学(徐振康等19924 物学(侯林等1991”’)、遗传学(查尔斯．E．金1998。1，王壬学等1991“…，张闰生等199I““， 科才有较多的报道。因此，关于卤虫的分类学、种的鉴定及种群的分子群体遗传学、种群 的系统发生及进化、优良品系的选育的研究一宜引起生物学工作者的极大兴趣。本研究选 取中国孤雌生殖卤虫为对象，利用随机扩增多态DNA(RAPD)及ISSR分子生物