飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展.pdf

第22卷 第12期 生命科学 Vol. 22, No. 12 2010年12月 Chinese Bulletin of Life Sciences Dec., 2010 文章编号 ：1004-0374(2010)12-1215-14 飞蝗嗅觉的细胞与分子机制研究进展 张　龙 (中国农业大学，农业部生物防治重点实验室，北京100193) 摘　要：生命的进化依赖于其周边的化学环境，通过对这些化学物质的感受，适应环境，生命得以繁 衍。直到现在，各种有机体仍然保留着这种古老而有效的感知方式。飞蝗是世界性的农业大害虫，其 很多行为如远距离迁飞、聚集、取食、产卵等是其造成灾害的重要生物学因素，而这些行为都与其 感受化学信息相关。深入研究飞蝗感受化学信息的机制对于揭示生物感受化学信息的分子和细胞机制的 多样性，设计出可以激发或钝化这些蛋白质的引诱剂或忌避剂，进而防治害虫等具有重要意义。该文 主要介绍了该课题组在东亚飞蝗(Locusta migratoria manilesis)感受化学信息机制方面的一些进展。通过 超微结构研究发现在飞蝗触角上至少有毛形、锥形、腔锥形和刺形4 种类型的化学感受器，明确了各 种感受器的超微结构特征，其中毛形和锥形是重要的嗅觉感受器。以此为基础，单感受器电位记录试 验结果表明飞蝗触角上的毛形感受器至少有7 种功能亚型，其中5 种亚型每个感受器含有2 个神经原， 2 种亚型每个感受器含有3 种神经原。初步明确了飞蝗毛形感受器神经原对一些化学信息的编码特征。 在飞蝗的触角中鉴定出了飞蝗气味分子结合蛋白(LmigOBP1)，通过免疫细胞化学定位实验证明该蛋白特 异表达在飞蝗毛形和锥形感受器的淋巴液中，而且在胚胎即将孵化前就开始表达，此后在各个胚后发育 时期都表达，说明该蛋白可能参与飞蝗胚后发育的所有阶段的嗅觉活动。采用荧光竞争结合实验方法， 明确了LmigOBP1 对有15~17 个碳原子的直链的脂肪族醇、酯或醛有很强的亲和力，说明该蛋白有结合 特异性。采用生物信息学技术模拟出了更为合理的 LmigOBP1 的三维结构，通过对接实验，提出了飞 蝗气味分子结合蛋白结合腔中可能参与结合十五醇的氨基酸残基。之后通过定点氨基酸突变将59 位的丝 氨酸、74 位的天冬酰氨和87 位的缬氨酸分别用丙氨酸替代获得三个突变体蛋白(S59A、N74A、V87A)， 通过与野生型蛋白荧光竞争结合实验结果的比较，发现突变体S59A 的结合模式与野生型相同，N74A 几乎丧失了全部结合能力，而V87A 则对有些气味分子的结合能力有较大改变。因此，位于结合腔开 口处的74 位天冬酰氨是该蛋白的重要结合位点，而位于结合腔底部的87 位缬氨酸也是结合位点。结合 前人的结果，我们首次提出了昆虫气味分子结合蛋白依赖位于结合腔开口处的亲水性氨基酸实现对气味 分子的初始识别的假说。文章最后对今后研究的一些重点进行了讨论。 关键词：飞蝗；化学感受；嗅觉神经原；化学信息编码；气味分子结合蛋 白；结合位点；结合特 异性；结合行为 中图分类号：S433.2, Q617 文献标识码：A Cellular and molecular olfaction mechanisms of locust ZHANG Long (Key Lab for Biological Control of the Ministry of Agriculture, China Agricultural University, Beijing 100193, China) Abstract: Organisms evolve with their ability sensing environmental chemicals, and they still maintain this old and efficient receptive ability. As one of t