探索耳针预防大鼠非酒精性脂肪肝的研究.docVIP

探索耳针预防大鼠非酒精性脂肪肝的研究 温佩彤 段丽娟 茅骏霞 陆玉瑾 邵晓炜 指导老师：赵英侠 上海中医药大学2005级针灸推拿英语七年制，201203 [摘要] 目的：探索耳针预防非酒精性脂肪肝的作用。方法：将37只大鼠随机分为正常组、模型组、揿针组和磁珠组。测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等血清学指标，并进行肝组织病理切片，探索耳针对于预防大鼠非酒精性脂肪肝的作用。结果：1. 模型组ALT、TC升高, 与正常组比较有显著性差异（ P0.05），说明造模成功。2. 肝组织病理形态学肉眼观察及切片显示造模成功，而且预防有效。结论：1. 非酒精性脂肪肝的大鼠造模成功。2.耳针对非酒精性脂肪肝有预防作用。 [关键词] 耳针；非酒精性脂肪肝；动物实验 引言： 非酒精性脂肪肝（NAFLD） 是一种常见的临床病理综合征，具有广泛的疾病谱，包括一系列肝损伤，如单纯脂肪变性、脂肪性肝炎（NASH）, 被认为是代谢综合征在肝脏的表现。有资料显示在排除其它肝病后，NAFLD通常是无症状转氨酶升高的最主要原因，约占90%；其发病率在不同国家也各有不同。随着人们生活水平的提高、饮食结构的变化、老龄化人口的增加, NAFLD的发病率呈逐年上升趋势。有部分患者发生肝硬变，甚至可出现肝硬变的一系列严重并发症， 预后不良[1-2]。NAFLD的预防比治疗更重要，所以本研究旨在研究揿针和磁珠两种耳穴刺激方法是否对非酒精性脂肪肝大鼠模型有预防作用，而可以进一步应用于人们的日常生活，成为更简便、安全、价廉、有效的预防方法。 1 材料与方法 1.1材料 1.1.1实验动物 普通级Wistar大鼠36只，赠送1只，共37只，雄性，体重170g~200g，由上海中医药大学实验动物中心提供。 1.1.2饲料 基础饲料：由上海中医药大学实验动物中心提供。 高脂饲料：基础饲料78.8%、猪油10%、蛋黄粉10%、胆固醇1%、胆盐0.2%，由上海中医药大学实验动物中心提供。 1.2方法 1.2.1分组与造模 将37只大鼠适应性喂养3天后，运用随机数字表，将动物随机分为4组(A、B、C、D)，除模型组10只外，其余各组均9只。A组为正常组，喂饲基础饲料；B组为模型组，喂饲高脂饲料；C组为揿针组，喂饲高脂饲料；D组为磁珠组，喂饲高脂饲料。 1.2.2 耳穴刺激方法 取大鼠耳穴脾、三焦、神门。C组（揿针组）用揿针针耳穴，透刺耳部。D组（磁珠组）用磁珠贴耳穴，耳部正反面对贴，有利于磁循环。两组均每3日一次，每次三穴皆取，每次只刺激单侧耳穴，两耳交替使用。5次为一个疗程，每个疗程间隔3天，共刺激两个疗程。A组（正常组）和B组（模型组）不作任何处理。 图1 耳穴定位图 1.2.3检测指标及方法 1.2.3.1一般情况：活动自如，对外界反应迅速。但是喂饲高脂饲料各组大鼠所吃饲料量比正常饲料组少。 1.2.3.1 体重：每个疗程结束后用电子秤称一次体重。 1.2.3.2 血清生化指标测定：各组大鼠于2个疗程结束后，用2%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉动物，打开腹腔，腹主动脉取血，2500r/min离心10min后取血清，标本由上海中医药大学附属曙光医院东院检验科检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)。 1.2.3.3 肝重及肝组织病理切片 各组大鼠于2个疗程结束后，分离出肝脏，滤纸吸干后用万分之一电子天平称其重量；另外各组取4只大鼠的肝组织送教学实验中心病理切片室进行石蜡包埋切片，HE染色，光学显微镜观察肝脏的病理变化。 1.2.4统计方法 资料经Excel整理后，采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。组间比较完全随机设计的多个样本比较的秩和检验Kruskal-Wallis Test。 2结果 实验过程中，D组（磁珠组）大鼠死亡1只，系耳穴刺激人为操作失误造成。另外，在腹主动脉取血过程中，揿针组和磁珠组均取血未成功1只，揿针组有1只血清学指标数据为异常值，统计时剔除。故揿针组和磁珠组最后各剩7只。大鼠经常相互将耳穴上的揿针或者磁珠撕扯掉。 2.1揿针和磁珠对大鼠血脂水平的影响 2个疗程结束后，模型组ALT、TC升高, 与正常组比较有显著性差异（ P0.05），说明造模成功。（表1）。 表1 各组大鼠血脂水平的变化（mmol/L，X±S 9 37±5.56 87±10.22 1.34±0.18 1.72±0.57 模型组 10 51±11.86* 120±24.99 3.51±0.84 1.37±0.40 揿针组 7 54±12.42* 196±103.21 3.59±1