激光共聚焦显微镜在淀粉结构研究中的应用.pdfVIP

激光共聚焦显微镜在淀粉结构研究中的应用 陈佩，李远志，吴雪辉，肖楠 (华南农业大学食品学院，广东广州510642) 摘要：在淀粉研究中，淀粉颗粒结构的研究是重要的内容。激光共聚焦显微镜通过仪器进行的一种无损伤性的方法， 可以原位测定淀粉颗粒结构及糊化淀粉的残余结构。CLSM足淀粉研究中的一个强有力的工具，将会在淀粉研究的各个 方面得到广泛的应用。 关键词：激光共聚焦显微镜，淀粉。结构 inthe OfConfocalLaser StructureofStarchResearch Application ScanningMicroscope PeiChen，YuanzhiLi，XuehuiWh，N硼Xiao ofFood College Science，SCAU，Guangzhou，China Abstract：Thestructureofstarch iSan contentinthestarchscienee．Confocallaser granuleimportant scanningmicroscopy a toolforthevisualisationofstarch fromtIleirbotanical intotheirfinal (CSLM)iSpowerful granules source，duringprocessing allowsthevisualisationofthestarch andof remnantsinstarch intheir application．CSLM gelatinisationprocess granule pastes environmentandwithoutmodification．CLSMisaforcefulmethodinthestarchresearchandwiilbe inatl origi．hal widelyapplied Ofstarchresearch． respects Keywords：CLSM，starch，structure 中图分类号：TS201．1文献标识码：A CLSM是近十几年迅速发展起来的一项新的显微技术，已在生物科学，材料科学等领域得到了广泛 的应用。传统的显微镜只能形成二维的彩色图像，激光扫描共聚焦显微镜通过对同一样品不同层面的实 时扫描成像，进行图像叠加构成样品的三维结构图像。激光共聚焦显微镜图像的采集方法是通过仪器进 行的一种无损伤性的方法，它使用光线而不是使用机械方式完成对标本的切片。光学切片的厚度可通过 光探测器前面的针孔直径而轻易获得。 在淀粉形态研究中，淀粉颗粒的内部结构是重要的未知内容。因为淀粉显然不是小分子的结晶与聚 集而是高分子聚合物。但是淀粉颗粒内部的微观结构需要将颗粒切开或掰开后才能观测到。获得淀粉颗 粒内部结构的图像，一直是淀粉科学中的研究重点。现代化仪器和分析方法的发展对揭示淀粉的内部结 构起来决定性的作用。特别是显微技术和近代的质谱分析技术的发展对揭示淀粉的结构信息有突出贡 献。共聚焦激光扫描显微镜等技术曾用于高粱、玉米等淀粉结构的研究，研究表明，淀粉颗粒结构有大 量的微孔和通道lIoJ。 l激光共聚焦显微镜分析技术的原理 CLSM利用计算机进行图像处理，把光学成像的分辨率提高了30％-40％，通过一种或多种荧光探针 标记后可对固定的组织或活体标本进行观察研究。当这些标本用普通荧光光学显微观察时，来自焦点以 外的其他区域的荧光对结构的分辨率干扰较大，尤其是标本的厚度在2微米以上时，其影响更为明显。 共聚焦方法可排除“焦点以外”荧光的干扰使侧向和抽向分辨率提高。CLSM的分辨率比普通宽视野光学 显微镜的分辨率高(最大理沦分辨率为0．2微