骨活素在急性环孢素中毒SD大鼠肾组织中的表达及其作用机制.pdfVIP

中南大学学报（医学版） 　２０１１，３６（９）　　ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｓｕｍｅｄ．ｏｒｇ；ｈｔｔｐ：／／ｘｂｙｘ．ｘｙｓｍ．ｎｅｔ ＪＣｅｎｔＳｏｕｔｈＵｎｉｖ（ＭｅｄＳｃｉ） ８８１ 骨活素在急性环孢素中毒ＳＤ大鼠肾组织中的表达 及其作用机制 叶明佶，谢续标，彭龙开，谭亮，蓝恭斌，余少杰 （中南大学湘雅二医院泌外器官移植科，长沙４１００１１） ［摘要］　目的：探讨骨活素（ｏｓｔｅｏａｃｔｉｖｉｎ，ＯＡ）在急性环孢素（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ，ＣｓＡ）中毒ＳＤ大鼠肾组织中 的表达及其作用机制。方法：在正常饮食１周后随机将ＳＤ大鼠分为３组：试验组（ＣｓＡ＋橄榄油灌胃）、载体 对照组（橄榄油灌胃）和空白对照组（生理盐水灌胃）。各组分别于灌药后２ｄ、１周、２周分批处死，测定血肌 酐（ｓｅｒｕｍｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ，ＳＣｒ）及体质量变化；ＨＥ染色评判肾组织病理学改变；免疫组织化学检测肾组织ＯＡ的着 染情况；Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测ＯＡ蛋白的表达；ＲＴＰＣＲ检测ＯＡ、基质金属蛋白酶１３（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ１３， ＭＭＰ１３）、 型胶原（ｃｏｌｌａｇｅｎｔｙｐｅ ，Ｃｏｌ ）ｍＲＮＡ的表达。结果：试验组ＳＤ大鼠的体质量和ＳＣｒ在灌胃２ｄ Ⅲ Ⅲ Ⅲ 和１周末与对照组相比差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），２周时体质量较对照组显著减轻（Ｐ＜０．００１），ＳＣｒ显著 升高（Ｐ＜０．００１）。试验组ＳＤ大鼠病理组织学改变主要为炎性细胞浸润、肾小管上皮细胞、间质细胞空泡变 性及肾小管上皮细胞坏死脱落等。免疫组织化学显示试验组ＳＤ大鼠肾组织内ＯＡ的表达随ＣｓＡ灌胃时间的 延长而增加，其表达部位主要位于肾小管上皮细胞及间质细胞，对照组基本不表达。ＲＴＰＣＲ显示试验组ＯＡ， ＭＭＰ１３及Ｃｏｌ ｍＲＮＡ的相对表达量随着ＣｓＡ灌胃时间的延长而增加。Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹检测显示，ＯＡ蛋 Ⅲ 白在空白对照组及载体对照组基本不表达，随着试验组ＣｓＡ灌胃时间的延长，ＯＡ蛋白的表达增强。结论：ＯＡ 在ＳＤ大鼠急性ＣｓＡ肾中毒模型早、中期有表达且较ＳＣｒ敏感，表达部位主要位于肾小管上皮细胞及间质细 胞；在肾小管上皮细胞内早期反应性表达上调的ＯＡ可能通过激活ＭＭＰｓ的表达和胶原蛋白的重构从而在诱 发肾间质纤维化中发挥关键作用。 ［关键词］　 骨活素；　急性环孢素中毒；　基质金属蛋白酶１３；　 型胶原 Ⅲ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２７３４７．２０１１．０９．０１２ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｏｓｔｅｏａｃｔｉｖｉｎｉｎｔｈｅｋｉｄｎｅｙ ｏｆＳＤｒａｔｓａｆｔｅｒａｃｕｔｅｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡｔｏｘｉｃｉｔｙ ＹＥＭｉｎｇｊｉ，ＸＩＥＸｕｂｉａｏ，ＰＥＮＧＬｏｎｇｋａｉ，ＴＡＮＬｉａｎｇ，ＬＡＮＧｏｎｇｂｉｎ，ＹＵＳｈａｏｊｉｅ （ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＵｒｏｌｏｇｉｃａｌＯｒｇａｎＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，ＳｅｃｏｎｄＸｉａｎｇｙａＨｏｓｐｉｔａｌ， ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ４１００１１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｏｓｔｅｏａｃｔｉｖｉｎ（ＯＡ）ｉｎ ｔｈｅｋｉｄｎｅｙｂｙｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇＳＤｒａｔｍｏｄｅｌｏｆａｃｕｔｅｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ（ＣｓＡ）ｔｏｘｉｃｉｔｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＳＤｒａｔｓ ｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｄｉｅｔｆｏｒａｗｅｅｋ，ｗｈｉｃｈｔｈｅｙｗｅｒｅｔｈｅｎｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ３ｇｒｏ