二甲双胍对PCOS大鼠子宫内膜和卵巢IRS-1、IRS-2蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响.pdf

中文摘要 二甲双胍对PCOS大鼠子宫内膜和卵巢IRS-I、IRS-2 蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度的影响 摘 要 ovary 目的：多囊卵巢综合征(polycystic 的导致生殖功能障碍的内分泌失调性疾病，发病率占全球育龄女性 5％～10％，主要表现为持续性不排卵，以高雄激素血症和高胰岛素．血．症 胖，均存在不同程度的探讨胰岛素抵抗(insulin 尚不清楚，在人体中很难进行对照研究。本研究旨在比较IRS．1、IRS一2 蛋白表达及酪氨酸磷酸化程度在PCOS大鼠与正常大鼠的异同：研究二 酸磷酸化程度的影响；探讨二甲双胍改善PCOS大鼠子宫内膜和卵巢局 部IR的发生机制，进而指导PCOS的临床治疗。 方法： 1实验动物及分组 1l 号：1 1063。(见Fig．1) 1．2随机分组：空白对照组10只，模型对照组20只，二甲双胍组20 121 ／、o 2实验方法 大鼠模型，每日颈背皮下注射3IU注射绒毛膜促性腺激素(humen chorionic gonadotrophich 剂量递增的中效胰岛素，由O．5IU／天递增至6．0IU／天，以后每天固定剂 量注射6．OIU，22天后检测大鼠血睾酮和胰岛素水平增高以及阴道涂』．；。 持续出现角化细胞者符合PCOS模型。空白对照组同期皮下注射生理击垒 水。 中文摘要 2．2药物干预实验：造模成功后每日分别给予空白对照组和模型对照组 大鼠2ml蒸馏水灌胃，给予二甲双胍组大鼠二甲双胍3mg／kg(按大鼠 与人体重系数折算剂量)灌胃，1天1次，22天后放血将各组大鼠处死。 3标本采集及测定 3．1标本采集：抽取大鼠心脏血，分离血清，采用化学发光免疫法测定 血清激素水平；打开大鼠腹腔，观察双侧卵巢和子宫的大体形态，分别 测量三组大鼠卵巢湿重，取卵巢和子宫组织以10％多聚甲醛固定，石蜡 包埋。 (见Fig．2、Fig．3、Fig．4) 3．2标本测定：光学显微镜观察HE染色子宫内膜及卵巢大体形态变化； 免疫组织化学染色检测IRS．1和IRS．2在子宫内膜及卵巢的定位表达及 酪氨酸磷酸化程度。 结果： 模型对照组和二甲双胍组大鼠在采用Poretsky法造模22天后检测 血睾酮和胰岛素水平增高以及阴道涂片持续出现角化细胞者为造模 成功的PCOS大鼠，共计33只，造模成功率为82．5％。 l激素水平的变化 模型对照组T和INS水平较空白对照组明显增高(P<O．01)，二甲双 胍组INS水平与模型对照组相比显著降低(P<O．01)，但仍高于空白对照 组水平(P<0．01)。二甲双胍组T水平与模型对照组相比有所下降(P< (见Tablel) 0．05)，但仍高于空白对照组水平(P<O．01)。 2卵巢湿重变化 +经电子天平测定，三组大鼠卵巢湿重分别为：空白对照组 (0．0258士0．001 加(P<O．01)，二甲双胍组大鼠卵巢湿重模型对照组相比明显降低(P< 0．01)。(见Table2) 3卵巢的形态学变化 空白对照组大鼠卵巢色泽红，可见黄体；镜下可见多个黄体及不同 发育阶段的各级卵泡，其中优势卵泡可见8～9层颗粒细胞。模型对照 组卵巢为淡红色，体积增大，极少见黄体形成；镜下可见卵泡囊性扩张， 未见卵母细胞及放射冠等基本结构，仅见1"2层颗粒细胞及大量闭锁 中文摘要 卵泡。二甲双胍组卵巢色泽红，可见黄体；镜下可见各级卵泡及多个黄 体形成，少见或未见囊性扩张卵泡，优势卵泡内可见卵冠丘、卵泡液， 颗粒细胞层数明显增多。 (见Fig．5) 4子宫内膜的形态学变化 空白对照组大鼠子宫色泽鲜润；镜下可见子宫内膜腺体数量较多， 腺腔大而多褶，呈簇状排列，腺上皮中可见分泌泡。模型对照组子宫略 显充盈；镜下可见子宫内膜腺体数目明显减少，腺腔小而直，排列较分 散。二甲双胍组子宫色泽较鲜润；镜下可见子宫内膜腺体数目增多，腺 腔多小而直，部分可见到皱褶和分支，出现簇状排列。 (见Fig．6) 5免疫组织化学染色结果