生防菌哈茨木霉FJAT-9040固体发酵培养基的响应面优化.doc

生防菌哈茨木霉FJAT-9040固体发酵培养基的响应面优化 曾庆才1，2，肖荣凤2，刘 波2*，胡桂萍2 福州大学生物科学与工程学院，福建 福州 350108；2.福建省农业科学院农业生物资源研究所，福建 福州 350003） 摘 要：利用响应面方法研究生防菌哈茨木霉FJAT-9040固体发酵的培养基，探索疏松值、无机碳源、无机氮源对产孢量的影响。单因子实验结果表明：哈茨木霉固体发酵培养基的主成份、疏松值、最适无机碳源、最适无机氮源分别为微生物养猪垫料：麸皮＝9：1、麦粒40%、蔗糖3%、硫酸铵2%。响应面分析结果表明：麦粒、蔗糖、硫酸铵对哈茨木霉产孢量有显著相关性，通过求解回归方程可得：当麦粒含量36.72%，蔗糖含量3.08%，硫酸铵含量1.74%时，孢子产量可达2.80×1010个/g。 关键词：哈茨木霉 固体发酵 培养基 产孢量 响应面分析法 中图分类号 Optimization of solid-state fermentation culture medium for the biocontrol strain of Trichoderma harzianum FJAT-9040 by response surface methodology. Abstract: Response surface methodology was used to optimize solid-state fermentation culture medium of Trichoderma harzianum FJAT-9040. The influencing factors included loose value, inorganic carbon source, inorganic nitrogen source. The result of single factor showed that the main component of culture, the loose value, the fittest inorganic carbon source and inorganic nitrogen source were the bedding of microbial pig raising and wheat bran with the ratio of 9:1, wheat grain 40%, sucrose 3%, ammonium sulfate 2%, respectively. The result of response surface methodology showed that wheat grain, sucrose and ammonium sulfate were significant for the spore of Trichoderma harzianum. The optimum medium were as followed: wheat grain 36.72%, sucrose 3.08%, ammonium sulfate 1.74, the average yield of spore reached to 2.80×1010 cfu/ g under the optimal conditions. Key words: Trichoderma harzianum FJAT-9040; Solid-state fermentation; Culture medium; Sporulation quantity; Response surface methodology 木霉菌是一种广泛分布于土壤中，生命力强，适应性广，对许多植物病害的病原真菌有拮抗作用（张爱萍，2009）。据不完全统计，它可以对18个属29种植物病原真菌有拮抗作用（陈 捷等，2011）。因此，木霉菌作为一类具有重要的生防作用的生防因子而倍受关注（庄敬华等，2006）。具有拮抗作用的木霉很多，包括哈茨木霉、绿色木霉、钩状木霉、康宁木霉等（彭可为等，2010）。而哈茨木霉的应用最多，如对黄瓜枯萎病、小麦纹枯病、番茄灰霉病等病原真菌的抑制作用（刘爱荣等，2010；管怀骥等，2011；姚 彬等，2009）；对黄瓜、花生和茄子等多种作物促进生长的作用（杨春林等，2008；王献慧等，2012；胡 洁等，2012）；诱导水稻等抗病性（Nzojiyobiri jean Berchmans等，2003）等等。 木霉菌要有良好的防治效果，生产发酵是关键。目前，生产上木霉的应用多有孢子菌剂，虽然不少学者对其代谢产物在生防作用上进行了研究（李 杰等，2011；王红梅等，2010；郭培磊等，2009），但是由于代谢产物的复杂性，