H5N1亚型禽流感病毒AGuangxi12005株抗药机制的研究(.pdfVIP

第34卷 第9期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vo1．34．No．9 2012 年 9 月 ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicine Sep． 2012 doi：10．3969~．issn．1008-0589．2012．09．02 H5N1亚型禽流感病毒A／Guangxi／1／2005 株抗药机制的研究 王 飞，吴珊珊，慈彦鹏，刘丽玲 ，田国彬，曾显营，管雪婷，李雁冰 ，陈化兰 (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室 ／农业部动物流感重点开放实验室 ／国家禽流感参考实验室，黑龙江 哈尔滨 150001) 摘 要：为研究H5N1亚型禽流感病毒(AⅣ)的抗药机制，本研究选取Clade2．3．4亚群中一株对金刚烷胺敏感 的人源AIVAJGuangxi／1／2005(H5N1)fS-GX05)，用抗流感病毒药物金刚烷胺对其进行定向诱导，筛选出一株抗药 性病毒株 ，命名为R．AJGuangxi／1／2005(R-GX05)。通过全基因测序并与 S-GX05全基因序列进行对比，结果显示 S-GX05只在其M2蛋 白中有一个氨基酸位点发生突变，即A]0p；抗药性鉴定这两株病毒的半数 药物抑制浓度 (IC)分别为0．9IxM和48．9 M，表明R-GX05对金刚烷胺表现出一定程度的抗性。动物实验证实，这两株病毒 对BALB／c小鼠的致病性基本一致，均表现 出高致病性，其MLD50分别为4．7logl0EID5o和5．0log10EID50，两株 病毒在小鼠体 内各组织脏器中的分布及增殖能力也基本相 同。这些结果表 明，S．GX05在药物压力下产生抗药性 后，并未引起其它生物学特性的改变。A]0P的发现为进一步从分子水平上研究H5N1亚型AIV 的抗药机制及新型 抗流感新药的研发奠定了基础。 关键词：H5N1禽流感病毒；抗药性；金刚烷胺 中图分类号 ：$852．659．5 文献标识码 ：A 文章编号 ：1008．0589(2012)09—0682．04 Mechanism oftheH5N1subtypeinfluenzavirus A／Guangxi／1／2005resistancetoantiviraldrug WANG Fei，WU Shan—shan，CIYan—peng，LIU Li—ling，TIAN Guo—bin，ZENG Xian—ying， GUAN Xue—ring，LIYan-bing，CHEN Hua—lan (StateAvianInfluenzaReferenceLaboratory，AnimalnIfluenzaLaboratoryoftheMinistryofAgricultural，StateKeyLaboratoryof VeterinaryBiotechnology，HarbinVeterinaryReserachnIstitute，ChineseAcademyofA culturalSciences，Hrabin150001，China) Abstract：Toinvestigatethemechanism ofinfluenzavirusresistancetoantiviraldrugofAmnatadine，htehighlypahtogenic H5N1subtypeavianinfluenzavirus(AIV)A／Guangxi／1／2005(S-GX05)wasinducedwiht 1，000 M ofAmnatadinefor15 passagesinMDCK cellculutreandhteresultingviruswasconvertedrfom sensitivetoresistantforAmantadine(designate R-6x05)．Sequenc