聚己内酯纳米纤维膜固定化溶藻菌对藻类和藻毒素的生物降解作用.pdfVIP

聚己内酯纳米纤维膜固定化溶藻菌对藻类和藻毒素 的生物降解作用1 1 1 2 1 2 1 于光 ，李云晖 ，姚琛 ，尹立红 ，李新松 ，浦跃朴 1 东南大学公共卫生学院，江苏南京 210009 2 东南大学化学化工学院，江苏南京 210096 E-mail: yppu@ 摘 要: 采用电纺法制备并表征了聚己内酯纳米纤维膜（NMP ）。将从太湖水体中分离到的 假单胞菌属溶藻菌固定化在聚己内酯纳米纤维膜（NMP ）、维纶 VNL 和阿科蔓材料（AQUA ） 等人工介质上，分析与比较不同人工介质固定化溶藻菌对太湖土著铜绿微囊藻和微囊藻毒素 LR 的生物降解作用。实验结果显示：NMP 吸水率、孔隙率、拉伸强度分别为81.33%±1.58、 78.68%±4.85、89.8±7.5 MPa。NMP 每平方厘米固定化溶藻菌的数量为5.65×107 ；NMP 固定 化溶藻菌对藻细胞的48h 溶藻率和对藻毒素的48h 降解率分别为85.68%、60.16%；溶解藻 细胞可重复利用次数达到4 次。与其他两种人工介质相比，NMP 是一种良好的固定化溶藻 菌的纳米人工介质，可以增强溶藻菌对铜绿微囊藻和藻毒素LR 的生物降解作用。 关键词：溶藻菌；人工介质；固定化；生物降解；微囊藻毒素 1．引言 随着经济的发展，大量工农业废水、生活污水的排放以及水产养殖业的污染，导致水 体富营养化加剧，有害藻类藻水华不断发生。有害水华已经引起了许多严重的健康问题，例 如饮用水中毒和消化道肿瘤等[1] 。利用溶藻菌治理水华是一个很有潜力的方向，然而自然水 体中的溶藻菌浓度相对较低，溶藻菌的除藻作用受到明显的限制[2] 。通过人工介质固定化溶 藻菌，则可以使局部水环境中的溶藻菌浓度大幅度增高，从而提高其除藻效率。因此，人工 介质固定化溶藻菌是一项有着实际应用价值的新型除藻技术[3] 。 本课题组前期从太湖发生水华的水体中分离得到一株假单胞菌属的溶藻菌，研究证明该 菌对太湖蓝藻具有较强的溶藻作用[4] 。在前期工作的基础上，采用自行设计的新型电纺技术， 合成了具有超高比表面积，良好生物相容性和亲水性等特性的聚己内酯等纳米纤维膜，作为 固定化溶藻菌的新型人工介质。本研究比较聚己内酯纳米纤维膜（NMP ）与目前常用的人 工介质材料维纶 VNL 、以及阿科蔓材料 AQUA 等固定化溶藻菌对太湖土著铜绿微囊藻的 溶藻作用和对微囊藻毒素 MC-LR 的降解作用效果，为聚己内酯纳米纤维膜作为微生物固定 化的新型人工介质今后的工程化应用提供科学依据。 2. 材料与方法 2.1 试验材料 溶藻假单胞菌和铜绿微囊藻均为分离自太湖的土著溶藻菌和产毒铜绿微囊藻。 聚己内酯纳米纤维膜（NMP ）为本实验室采用电纺法合成。 维纶 VNL 和阿科蔓材料 AQUA 为商品化人工介质，均为购得。 2.2 微囊藻毒素的分离提取方法 2.2.1 水样的预处理、富集、淋洗 1本课题得到江苏省自然科学基金（项目编号：BK座机电话号码 ）、教育部博士点专项科研基金（项目编号： 座机电话号码035 ）、国家基础研究重点项目（项目编号：973，2006CB705602 ）的资助。 - 1 - 取适量水样（400～1000mL），经0.45μm 微孔滤膜过滤后，滤液备用。固相萃取小柱 预先用5mL 甲醇、20ml 去离子水各活化两次，通入水样滤液，过柱速度为5mL/min 。然后 用40mL 去离子水、20mL 10% 甲醇、20mL 20% 甲醇淋洗除去杂质。 2.2.2 微囊藻毒素的洗脱、浓缩 用5mL 0.1%的三氟乙酸甲醇溶液分3 次将微囊藻毒素洗脱，洗脱时成滴缓慢流下，溶 出于5mL 特制刻度锥底管。然后将锥底管置于45 ℃恒温水浴，吹入洁净空气，吹至半干后 加入0.1%三氟乙酸甲醇溶液定容至0.4 mL，经0.45μm 有机系针头滤器过滤，-20℃保存， 利用高效液相色谱（HPLC ）测定微囊藻毒素的浓度。 2.