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- 2017-09-04 发布于广东
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Trizol使用说明书
一、分离纯化的基本原理
研究基因的表达和调控时常常要从组织和细胞中分离和纯化 RNA。RNA 质量的高低常常影响
cDNA 库,RT-PCR 和 Northern Blot 等分子生物学实验的成败。Trizol 是一种新型总 RNA 抽提试
剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶。
二、用户需自备的试剂和材料
无水乙醇、氯仿、Glycogen (可能需要)、 1.5ml Eppendorf 管 (RNase-free)、 Tips
(RNase-free)
三、准备工作
RNase 酶非常稳定,是导致 RNA 降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活,但
限制因素去除后有迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂都不能是RNase 完全
失活。它广泛存在于人的皮肤上,因此,在与 RNA 制备有关的分子生物学实验时,必须戴手套。
RNase 的又一污染源是取液器,根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用用
DEPC 配制的 70%乙醇擦洗取液器的内部和外部,基本达到要求。取 RNase-free 的物品时必须戴
手套。
1、 料制品的处理
尽可能使用无菌,一次性塑料制品,已标明 RNase-Free 的塑料制品
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