中国被毛孢(Hirsutella+sinensis)菌丝体提取物的抗氧化活性研究.pdfVIP

中国菌物学会第三届药用真菌学术研讨会论文集 sinensis)菌丝体 中国被毛孢(Hirsutella 提取物的抗氧化活性研究 韩洪坤1，杨晓彤唧，杨庆尧2，冯慧琴1，杨明俊1 -上海师范大学微生物与免疫学研究所 上海200234 z上海芝草生物技术有限公司 上海200234 摘 要：冬虫夏草是我国名贵中药材之一。具有广泛的药理活性。本文研究了中 国被毛孢茵丝体水提物的还原力、DPPH自由基清除力、·OH自由基清除力、螯 合Fe2+能力及其保护PCI：细胞免受H202氧化损伤的能力。结果表明：中国被毛 孢茵丝体水提物均具有一定的还原力、DPPH自由基清除力、·OH自由基清除力 和螯合Fe2+能力，并且在一定范围内具有较好的量效关系；细胞实验表明它能够 2细胞的损伤，显著提高PCI2细胞在双氧水损伤条件下的存活 延缓H20：对PCI 率。 关键词：冬虫夏草茵。抗氧化，清除自由基，PCI：细胞 氧化损伤与癌症、炎症、衰老、心脑血管疾病、糖尿病及其并发症、肺纤维化、神经 退行性疾病等诸多疾病均有密切关系11,2]。自由基是造成氧化损伤的主要物质基础[31。这些 自由基物质虽然是体内众多的生理活动所必需的刚；但过多产生的自由基，或不能被及时 地清除，就会攻击机体内的生命大分子物质及各种细胞器，造成机体在分子水平、细胞水 平及组织器官水平的各种损伤，加速机体的衰老进程并诱发各种疾病。抗氧化、减少过多 自由基的产生或促进机体产生内源性的抗自由基物质，提高机体对自由基氧化损伤的自我 保护能力．可在一定程度上预防相关疾病的发生或改善症状。 冬虫夏草Cordyceps 性，能补肺益肾、调节免疫功能、抗疲劳、抗癌等嘲，并具有抗氧化和保护氧化损伤的作 用溉硎。抗氧化活性被认为是冬虫夏草的重要药效机制之一阴。因为它独特的药理功效、高 昂的经济价值和逐渐减少的野生资源，冬虫夏草的人工培养成为研究热点。2010年中国 sinensis 被毛孢(Hirsutella ·65． 中国菌物学会第三届药用真菌学术研讨会论文集 是冬虫夏草正确的无性型[10,1z，12,131．但目前对人工培养获得的中国被毛孢菌丝体是否与天然 冬虫夏草具有相似的化学组成和药用价值尚缺乏足够的研究。 本文对人工培养的中国被毛孢(Hirsutellasinensis)菌丝体热水提取物的抗氧化活性 进行了研究，分析了还原能力、DPPH自由基清除能力、·OH清除能力、络合铁离子能力 以及保护PCI：细胞免受H：O：损伤的能力，为探讨发酵培养的冬虫夏草菌药用作用提供理 论依据。 1材料与方法 1．1试剂与仪器 PCI2细胞来源于中科院细胞所：中国被毛孢发酵培养冻干菌丝体由上海芝草生物技 monosodium 洛嗪(Ferrozine，3-(2一Pyridyl)一5,6一is(4-Phenyl·sulfonicacid)1,2，4一tria—zine salt 建成生物工程有限公司；其他试剂均为国产分析纯。 分光光度计(岛津UV．2450型)；真空冷冻干燥机(Virtis美国)。 1．2样品制备 取冻干菌丝体研磨，过50目筛子，65。C恒重3h，干燥器内冷却至室温，然后准确称 50mL 取29置100mL圆底烧瓶，／JnA95％乙醇，浸泡2h后，70℃加热回流提取1h，提 取2次。过滤，滤渣置于通风橱内过夜。让乙醇充分挥发。然后用水替换乙醇按同样的方 法提取，提取温度为95℃，水提溶液旋转蒸发浓缩后，冷冻干燥获得水提物。 1．3 总还原力测定 TPTZ (40mmol／LHCl溶液配制)和20mmol／L