不同保存方法对羊膜生物学性能影响比较研究.pdfVIP

6 of Science)2010，V01．50No．11 NanchangUniversity(Medical 南昌大学学报(医学版)2010年第50卷第11期Journal 不同保存方法对羊膜生物学性能影响的比较研究 华 萍1，华 东2，赵集帅“，任 越“，万丽丹1，吕 虎¨ (1．南昌大学医学院解剖学教研室，南昌330006；2．永修县第二中学生物教研室，江西永修330300； 3．江西师范大学a．化学学院；b．生命科学学院，南昌330027) 摘要：目的 观察不同保存方法对羊膜生物学性能的影响。方法 取10例健康刮宫产产妇胎盘。剥离羊膜，将羊 mm20 膜平铺于无菌滤纸片上，上皮面朝上，剪成20 mm小块，随机分为3组，分别采用Hank’s平衡盐／甘油溶 液深低温(一80℃)保存、纯甘油4℃保存、冷冻干燥常温保存。分别于保存3、6、12个月取羊膜进行HE染色光镜 观察、胶原蛋白酶Ⅳ降解速度测定和细胞因子含量放射免疫测定，并与新鲜羊膜进行对照。结果①新鲜羊膜及3 种方法保存的羊膜均可见到羊膜的5层组织结构，自内向外依次为上皮细胞层、基底膜、敛密层、纤维母细胞层、海 绵层。新鲜羊膜的上皮细胞形态完好、排列较整齐紧密。其下可见厚而连续的基底膜，致密层、纤维母细胞层，海绵 层结构紧密。冷冻干燥常温保存3个月，羊膜组织形态特征与新鲜羊膜摹本相似，上皮细胞结构完整、排列紧密， 连续的基底膜、致密层、纤维母细胞层、海绵层清晰可见；保存6个月，上皮细胞形态基本完好、排列整齐，但基底膜 略显模糊，纤维母细胞层、海绵层相对疏松；保存12个月，上皮细胞形态基本完好但核上移，基底膜模糊．纤维母细 胞层、海绵层疏松变薄，其内出现空泡。Hank’S平衡盐／甘油溶液深低温保存3个月，羊膜上皮细胞形态基本完 好，基底膜略显模糊，致密层、纤维母细胞层、海绵层相对疏松；保存6个月，上皮细胞结构基本完整，连续排列但细 胞间隙较为模糊，基底膜更显模糊，致密层、纤维母细胞层、海绵层进一步疏松；保存12个月，上皮细胞皱缩，上皮 层连续性中断，基底膜及致密层基本完整，但各层结构模糊不清。纯甘油4℃保存3个月，羊膜上皮细胞皱缩，细 胞间隙加大，基底膜及致密层基本完整，各层结构依怖可见；保存6个月，部分上皮细胞破裂，基底膜完整，致密层、 纤维母细胞层、海绵层疏松；保存12个月，羊膜上皮细胞酃分脱落，基质层厚度变薄，基底膜、致密层模糊不清，部 分纤维母细胞层和海绵层缺失。②与新鲜羊膜相比，保存羊膜在胶原酶Ⅳ溶液中降解速度均有所加快。其中纯甘 油4℃保存羊膜降解速度最快，冷冻干燥保存羊膜降解速度最慢。③冷冻干燥保存羊膜中被检测的8种细胞因子 残存量均超过40％；Hank’S平衡盐／甘油溶液深低温保存和纯甘油4℃保存羊膜中8种细胞因子残存量均低于 20％，明显低于冷冻干燥保存之羊膜细胞因子存留避(Po．05)。结论3种方法中以冷冻干燥常温法保存羊膜 效果最好，纯fj‘油4℃保存方法效果最差。冷冻十燥常温羊膜保存时限以不超过1年、Hank’s平衡盐／甘油溶液 深低温保存不超过6个月、纯甘油4℃保存不超过3个月为宜。 关键词：羊膜；保存方法；生物学性能 中图分类号：R一331 文献标志码：A 文章编号：1000--2294(2010)11一o006一05 PreservationMethodson Effectsofdifferent Biological ofAmnioticMembrane Properties Yue铀，WAN Hu妯 HUA ji—shuai她，REN Li—danl，LV Pin91．HUAD