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第7卷 第4期 遗 传 学 报 Vol.7，N0．4 1980年 12月 ACTA GENETICA SINICA Dec.,1980 在处理春麦合子上化学诱变的效果 周社祯 谷爱秋 王钦南 耿玉轩 （中国科学院遗传研究所，北京） 早在1947年Auerbachl3，在利用芥子剂诱发果蝇突变的研究中，即发现有突变细胞 与正常细胞的嵌合现象 m（osaicism)。显然，在个体发育中，携带有突变细胞的个体，其所 产生的子代，则未必是由突变细胞发育而成。因此在突变细胞与正常细胞之间乃存在有 筛选竞争关系。如果人们能够最大限度地排除突变细胞被淘汰的作用，那么，在突变育种 上也就必然会达到显著地提高诱变率的效果。 1965年法国的Ferrary[21以及美国的 Singletont81等曾以高等植物为材料，利用物理 及化学因素直接处理合子或发育中的幼胚，各自发表了企图控制细胞间的筛选，从而提高 诱变率的研究报道。虽然他们未能有力地确证利用处理受精卵或原胚的特点可以大大提 高诱变率，但是，这些试验的设计E想，则是值得人们深人探讨的一个问题。同时，在后一 篇文章中，作者还特别地提到了当时一些学者所强调的 发“育中的胚对辐射较为敏感J，的 问题。这就是说，使用在发育中的幼胚作为理化诱变的处理材料，可能存在有两种优越 性： (1)最大限度地排除突变细胞被淘汰的可能性；(2)正当发育中的胚对理化因素诱 发突变较为敏感。 1976年PhanPhai等I一‘，用‘毛莫科植物黑种草 N（igelladamascenaL.）作材料，利用 X一射线及四种化学诱变剂处理个体发育的早期细胞，获得了在提高诱变率上极其成功的 结果。根据他们在第十四届国际遗传学会上的报告(71［，也已在水稻、大豆上进行了相同的 研究。证明该方法在诱发突变率上的效果，大约相当于处理千种子的2.5倍。 为了进一步探索这一方法可能达到的最佳效果，我们于1977-1979年进行了以化学 诱变剂— EMS处理春小麦合子的试验。在试验过程中，将处理时间仅仅局限在受精卵 时期，并且在受精卵第一次细胞分裂之前划分为早期及晚期，分别进行处理，借以进一步 确定在个体发育原始阶段最为敏感的时期，从而为化学诱变育种工作提供有效的理论依 据。 通过试验，证明了当进行化学诱变剂处理时期接近受精卵第一次分裂开始时，其诱发 突变的效果较为明显。现将试验结果简述如下： 材 料 及 方 法 本试验利用春小麦 Tanori品种为材料。在处理前，选择中部即将开花的麦穗进行整 穗，摘去上下部开花较迟的小穗，保留中部的小穗，并摘掉小穗顶部的小花，只留基部的两 朵小花；将每一小花的颖片剪掉约1/3。待穗部留下的小花即将开放时，用手轻轻搏动麦 本文于 1979年12月31日收到。 342 遗 传 学 报 丁卷 穗，促使开花；而后花药开裂，散粉，雄蕊伸出花外，此时记录为授粉时间。同时立即检查 授粉情况，去掉没有授粉的小花，确保授粉时间达到相对地一致。将检查合格的穗子套上 纸袋备用。 诱变剂溶液的配制：本试验应用的化学诱变剂为甲基磺酸乙醋 (EMS)。使用浓度 为0.3务(V/V)。该溶液系用0.01M磷酸盐缓冲液 p（H7）为溶剂配制而成。 受精卵的处理，是当春小麦盛花期，在田间条件下，用EMS溶液直接对备妥的麦穗进 行处理。为了严格地处理受精卵，我们制定了一套快速检验植物受精卵发育状态的方法。 根据受精卵发育的时期，设置早期处理和晚期处理两个组合，用以验证在发育中的受精卵 对化学诱变剂作用最为敏感的时期。经过对受精卵细胞发育情况的观察，春小麦 Tanori 在盛花期，授粉后约1小时精核即可进入卵细胞。1.5小时可看到精核已附着在卵细胞核 的核膜上，并发生变形 （图1)。授粉后5-7小时核融合过程已渐趋完成，至授粉 18小时， 受精卵即将进人第一次分裂前期。授粉19小时后可出现核分裂前期以后的分裂相。待 到授粉后20小时，卵细胞核已分裂为二，此时即完成了受精卵的第一次核分裂。 所谓早