长鬣蜥的染色体组型和减数分裂联会复合体的研究1).pdfVIP

遗 传 学 报， 24(3);211--215,31993 滋etcGeneticasinioa 长TI9LKIr的染色体组型和减数分裂联会 复合体的研究” 王蕊芳 贺维顺 陈 佳2）施立明 （中国科学院昆明动物研究所，650107) 本文报道长截晰 (Physignothuscocincinus）有丝分裂染色体及 C-},Ag一带以及减数分裂 联会复合体枉过里。染色体数 2，二36,NF～48,核型组成为 12V十24m(v为双臂大染色 体，其中 No.2为亚中着丝粒染色体，m为微小染色体）。结构异染色质主要分布在小染色 体上。一对 Ag-NORs分布于第2对亚中着丝粒染色体末端。 关键词 染色体组型，联会复合体，长碳晰 长骸晰属爬行纲，有鳞 目，晰蝎亚目，徽晰科 （Agamidae)。在国外分布于越南、泰 国；国内分布于广东、云南和广西。数量较为稀少。据我们查阅的文献，尚未有染色体核 型及减数分裂联会复合体的报道。我们采用 C-,Ag一带染色技术，对长像晰的有丝分裂 染色体以及减数分裂联会复合体进行了详细的观察，并讨论其遗传进化，分类地位等有关 间题。 材 料 和 方 法 一（）有丝分裂染色体标本制备 实验用的一只雄性长徽晰购自云南省河口县。采 用常规的白细胞培养和骨髓细胞短期培养方法。(1)骨髓细胞培养：取后肢股骨剔除肌 肉，以细胞培养液 8（0务 RPMI1640＋20务血清＋双抗）作为洗涤液洗两次。剪碎后取 细胞悬液接种于培养瓶中，置于26-270C恒温培养箱中培养16-18小时，收集细胞前 12-13小时加秋水酞胺，最终浓度为0.04}cg/ml左右，常规空气干燥法制片；(2）白细 胞培养：以。.5ml肝素湿润注射器，从心脏取血，于4℃冰箱中放置2小时，取富有白细 胞的血浆接种于青霉素小瓶中，每5ml培养液接种0.5m!细胞悬液。 培养液的组分为 8.0外的RMPI1640＋20务小牛血清十0.2mlPHA。在260C培养箱中培养96小时，收获 细胞前12--14小时加秋水仙素，最终浓度为0.02--0.03pg/ml，常规空气干燥法制片。 Giemsa染色，观察后褪色，按 Sumner191的BSG法稍加修改显示C一带，采用Howell和 Black[快速银染法显示 Ag-NORso 二（）减数分裂染色体标本制备 处死动物后立即取出塞丸，在a.5务 Kci溶液中 剪碎，室温下低渗25--30分钟，甲醇：冰醋酸 （3:1)固定，常规空气干燥法制片，10 Giemsa染色。 本文于 1991年8月 1，日收到。 1)本文承杨大同副研究员鉴定标本，徐林和郑加容协助统计及绘图，一并致谢． 2)现在北京动物研究所。 212 勺危 传 学 报 20卷 三（）联会复合体 S（C）标本的制备 用微铺张法12)，取少量攀丸置小匀浆器中，适 度破碎，再加人a.3多柠檬酸钠制成细胞悬液，室温下低渗 10--15分钟，取细胞悬液一滴 徐于有Falcon膜载玻片上涂匀，空气干燥。置4务多聚甲醛溶液中固定5--10分钟。按 Howell等[a]方法进行硝酸银染色，去膜，将膜置于光镜下观察，找到 Se分散良好的细 胞，将其转移到单孔铜网上，用R立H-300型电镜 （电压75kv）观察，拍照。SC的测量 参考WengKeaySang等I1D]的方法。 以10个细胞的测量结果计算SAC的平均相对长 度，并与相应的有丝分裂染色体的相对长度作相关性统计学分析，根据计算结果绘制一长鼠 晰SC与体细胞染色体的组型图。 结 果 与 讨 论 长鼠晰 150中期分裂相观察结果表明： 染色体数目为36的 占观察细胞总数的 80外。由此确定长鼠蝴的2，一36，其中有6对双臂大染色体 (No.1--No.6．以v表 示，No.2为亚中着丝粒染色体），其它 12对为微小染色体 （以m表示），NF-48,染色 体组型可轰示为1IN＋14M 臀（版I，A)。未见异型性染色体。 有丝分裂和减数分裂