岳鲤及其双亲（荷包红鲤♀、湘江野鲤♂LDH同工酶的研究.pdfVIP

遗传学报，15(1):465131988 通ctaGeneticaSinica 岳鲤及其双亲 荷（包红鲤？、湘江野鲤d LDH同工酶的研究 李 万 程 湖（南生物研究所，长沙） 用聚丙烯酞胺凝胶电泳，结合 CS910双波长扫描分析了岳鲤及其双亲 荷（包红鲤？、湘江 野鲤an)6种组织的乳酸脱氢酶同工酶 (LactateDehydrogenase,LDH)。结果表明：岳鲤及其 双亲的LDH 同工酶均存在组织特异性；亲本之间LDH同工酶的差异主要表现在肝脏；亲本 各组织的大多数LDH同工酶在F：代得到表现；亲本及F，代的LDH同工酶可能由基因位点 AA,BB共同控制。本文还讨论了LDH同工酶分析和杂交结果预测的关系。 关键词：电泳，LDH 同工酶，杂种鱼 有关鲤鱼 C（yprinuscarpioL.）的LDH 同工酶研究是从本世纪60年代末期开始 的。Klose[13，等人首先研究了鲤鱼心脏和肝脏的LDH同工酶。Enge]Elt3和Schmidtketlj 先后报道了不同生态群的鲤鱼的LDH 同工酶。 StarmarchJ先后报道了利用 LDH 同工酶来区别不同品系的鲤鱼。 国内直到1982年才有人1-〔3，开始陆续研究鱼类的 LDH 同工酶。而有关鲤鱼 LDH 同工酶的工作截止于 1985年10月尚未见到报道。 ．岳鲤系由江西婆源荷包红鲤为母本、湘江产的野生鲤鱼为父本，经人工杂交获得的 F,代，它在湖南地区有重要的养殖价值。作者在全面研究岳鲤及其双亲的生物学时，对 它们的LDH 同工酶进行了仔细分析，现将其结果报告于后。 材 料 和 方 法 、（一）材料来源 岳鲤和母本荷包红鲤取自长沙市郊区岳麓渔场，湘江野鲤取自湘阴县鱼类良种繁殖 场。三种鱼包括雌、雄个体共计 “尾 见（表1)，年龄为1-4龄。各种鱼运回实验室后， 于水箱中暂养，一周内全部用于实验。 二（）方法 1.酶液的提取 将鱼体表面的水分擦千，用剪刀将尾动脉截断，同时去鳃，在流水 中放血以减少组织块带血；随后解剖，迅速摘取晶体、脑、肌肉背（部白肌肉）、心脏、肝脏和 肾脏等6种组织，用天平称取0.30.5克，分别置于冰冻生理盐水中，用0℃生理盐水洗 涤组织块数次，一直到血污除尽为止。然后转人玻璃匀浆器中匀浆化，按1:6重（量／体积） 加人冰冻磷酸缓冲液 p（H7.0,0.1M)。匀浆时，每匀浆10次放回冰浴中冷却，匀浆后直 本文于1986年7月7S收到。 11期 李万程：岳鲤及其双亲 荷（包红鲤T、湘江野鲤e)LDH同工酶的研究 叮 襄1 实验鱼慈橄渔性别分布情况 Table1Totalnum阮randsexrat4oofF,b神ridanditsparentsusedforexperiments 鱼名 Nameoffish 雌 Female 雄 Male 荷包红鲤Cruybprroinfuusscucasrpreiodvar. 14 9 岳 鲤 F1hybrid 15 10 湘江野鲤Xiangjingo 6 12 接将匀浆物在60℃恒温水浴中加热1分钟，使粗提液的温度达到560C，立即放回冰浴中 保持冷却。然后在4℃下于高速冷冻离心机中离心45分钟，速度为18000转／分。取上 清液作为LDH 同工酶液存于冰箱中，24小时内完成酶样电泳分析。 2.酶样的电泳分析 按方丁[4]［所推荐的方法进行。丙烯酸胺和甲叉双丙烯酞胺均 经过纯化。分离胶的浓度为5.0外。电泳于4℃冰箱中进行，电流为2.5mA／每管，电泳时 间为150-180分钟。 3,酶带的显色和分辨 染色按 Show[lsa的配方有所改良。染色于37℃恒温水浴 一暗处进行。染色完毕后，将胶带