猪细小病毒WH-1株疫苗病毒增殖培养条件优化研究.pdfVIP

III IlfllIIIIfJ }IIIlllIflJ IIlip 』Y1 摘要 本研究用猪细小病毒wH．1株试制疫苗，在遵循《猪细小病毒(WH．1株)灭 活疫苗生产与检验规程》的前提下，通过对一系列影响病毒效价的因素进行优化， 最终确定了最优的病毒增殖培养条件。 不同细胞系对病毒效价的影响：用IBRS．2细胞与PK．15细胞分别接毒，结 果表明猪细小病毒WH．1株在IBRS．2与PK．15细胞上生长增殖收获的病毒效价 生长增殖，但IBRS．2更容易传代，所以选择其进行下一步试验。 不同培养方法对病毒效价的影响：用静置培养的IBRS．2扁瓶细胞4瓶和旋 转培养的转瓶细胞4瓶分别接毒，结果表明扁瓶静置培养方法收获的病毒效价显 著高于转瓶旋转培养方法(P0．05)。但是从生产角度上说，转瓶旋转培养更适 用，因此选择转瓶旋转培养进行下一步试验。 不同体积培养液对病毒效价的影响：用IBRS．2细胞接种猪细小病毒WH一1 异(PO．05)。但是从生产实践来看，每瓶加入1500ml的产量更高，能够提高 生产效能。 ． ． 培养液中不同血清浓度对病毒液效价影响：用IBRS-2细胞接种猪细小病毒 WH．1株，各试验组加入培养液的血清浓度分别加入8％、10％、12％。结果表明 培养液的血清浓度为8％收获的病毒液效价显著低于10％和12％收获的病毒液(P 生产成本和提高疫苗品质的角度来说，应该选择10％。 不同生长时间的细胞对病毒效价的影响：分别选取生长24h、48h、72h的IBRS 细胞接毒，结果表明生长时间为24h的细胞所产病毒效价显著低于生长时间为 72h的细胞(P0．05)，而生长时间为72h的细胞病毒效价显著低于生长时间为 48h的细胞(PO．05)。由此可见，选择生长时间为48h的细胞进行接毒，可以 获得效价最高的病毒液。 病毒液的免疫原性测定：在试验生产的病毒液中，选择效价达到规程标准要 求(105一TCID50／m1)的病毒液6批，并分为效价较低组和效价较高组，两者病 毒效价差异显著(P0．05)。将上述挑选的病毒液分别进行灭活、配苗和乳化， 分别用豚鼠和猪进行免疫原性测定。用豚鼠进行的免疫原性检验结果表明效价较 低组和效价较高组试制成疫苗后，免疫原性没有显著差异(PO．05)，都完全可 达到该疫苗的标准要求；用猪进行的免疫原性检验结果也可得出一致结论。 关键词：猪细小病毒；WH．1株；培养条件；优化 oftheconditionsfor Optimization porcine parvovirus(WH··1strain)culture Li Jie((PreventiveVeterinaryMedicine)) DirectedYah andYuRuo·-fei by Qi·-gni Abstract T11is trial wasaboutthe ofvaccine paper production againstporcineparvovirus onProcedurefor andTestofInactived (WH-1strain)．Basic Preparation Vaccine Porcine