麦门冬合千金苇茎汤对小鼠Lewis肺癌信号转导通路作用实验研究.pdfVIP

中文摘要 麦门冬合千金苇茎汤对小鼠Lewis肺癌信号转导通路作用的实验 研究 摘 要 研究目的：原发性支气管肺癌为当前世界各地最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁 着人类健康和生命。该病发病早期无特异性表现，大部分患者就诊时已处于中晚期阶 段，现行的常规的治疗手段效果不甚理想．近年来，中医药治疗肺癌在稳定病灶、延 长生存时间、改善生存质量等方面发挥了显著的疗效． 麦门冬汤是东汉末年张仲景所著《金匮要略》一书中所载的方剂，在Ⅸ金匮要略》 中主治“大逆上气，咽喉不利”之虚火咳喘。因为肺癌强调因虚致病，而虚主要强调 气与阴，是因虚而致病，因虚而致实．早期的虚多见肺脾气虚、或气阴两虚．麦门冬 汤气阴双补，培土生金，方中主要药物如麦冬、半夏、人参均是临床治疗肺癌时的常 用药物．千金苇茎汤是唐代孙思邈所著《备急千金要方》中所载，同样见载于《金匮 要略·肺痿肺痈咳嗽上气病》篇，在《金匮要略》中主治“咳有微热，烦满，胸中甲 错”之肺痈．选取该方的理由为痰瘀是肺癌的基本病机，贯穿于整个病程的始终．肺 癌局部的实不外乎气滞、血瘀、痰凝、毒聚的病理变化，而苇茎汤有清肺化痰活血化 瘀之功效，文献见有用本方加味治疗肺癌有效的报道。近年来，对肺癌的病因病机认 识趋向于把正气虚损学说和邪毒痰湿学说结合起来，临床采用扶正培本和清热解毒、 软坚化痰、活血化瘀酌情配伍治法，取得了较好的疗效。据此我们选取了《金匮要略》 麦门冬汤与《金匮要略》所载千金苇茎汤的合方为观察对象。本实验选用了Lewis肺 癌模型，观察该合方及与化疗药物顺铂(DDP)同用对LewiS肺癌的作用，及其对小 鼠免疫功能、肿瘤细胞凋亡和相关信号转导通路的影响，探讨该方的作用机制，冀其 对临床上的应用有所裨益，也为中医药吸纳现代科学成果提供思路。 研究方法： 我们选用C57BL／6小鼠的Lewi s肺癌模型作为研究对象，将50只20±29雄性 组(109／kg·d腹腔注射)、金方加DDP组(同时259／kg·d灌胃和109／kg·d腹腔注 射)，每组1O只。观察金方对小鼠LewiS肺癌移植瘤的作用，以及与DDP合用的效果。 麦门冬合干金苇茎汤对小鼠Lewis肺癌信号转导通路作用的实验研究 此外，我们制作了肿瘤组织的腿染色及EGFR、Raf、MEK的免疫组化染色，以进一步 观察金方的作用机制． 结果： 给药13天后DDP组、金方+DDP组小鼠出现不同程度的肢体无力，而其余三组没 有这种表现．所有荷瘤组小鼠行动较空白对照组迟缓，所有小鼠体温、毛发、饮食、 排泄情况未见异常。 金方可以改善小鼠一般情况，毒副作用也较DDP为小，能有效的增加荷瘤鼠的体 重。可能由于给药时间太短，其体重差异没有统计学意义，因为从小鼠体重记录看， 金方组的小鼠的体重呈明显上升的趋势，而DDP组则呈现下降的趋势。金方组的抑瘤 作用。结合病理情况来看，金方组的肿瘤组织有大量的坏死，微血管的增生也较少． 此外，金方组的胸腺指数和脾指数与模型组相比增大(pO．05)．DDP组的胸腺指数 和脾指数均小于模型组(p0．05)，因此有一定的保护胸腺和脾脏，增强胸腺和脾脏 的免疫调节功能的作用．从免疫组化的结果来看，金方对EGFR、Raf、MEK的抑制有 一定作用，而且是多靶点发挥作用。 量和体积增大，然而结合HE染色结果和免疫组化结果看，则更有效的促进了肿瘤组 织的坏死和抑制了肿瘤细胞信号转导通路的传导，在用药的三组中金方+DDP组对肿瘤 组织的坏死作用最为强烈，镜下可见大量的细胞核碎片，极少的微血管。因为肿瘤表 面没有破溃，所以坏死的组织留在肿瘤内部，可能增加了肿瘤的重量。金方+DDP组的 胸腺指数比模型组明显减小，pO．01。 在实验中我们观察到小鼠的肺部可见的转移结节很少甚至没有转移结节，这可能 与Lewis肺癌细胞株经过数次传代以后其毒力和侵袭力退化有关。 结论与意义： 金方对小鼠Lewis肺癌的肿瘤有一定的抑制作用，它可以有效增强胸腺和脾脏的 免疫调节功能，表现为抑制肿瘤对胸腺的抑制和促进脾脏的增生。金方对EGFR、Raf、 并促进了肿瘤组织的坏死，因而在腿切片中发现更多的坏死现象。综合本实验的结 果分析，金方主要是从增强免疫调控方面，促进肿瘤细胞凋亡或坏死方面及抑制肿