苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织培养一步成苗效应的研究(hao)(hao).pdfVIP

维普资讯 彭耀东等 苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织培养一步成苗的效应研究 27 苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织 培养一步成苗的效应研究* 彭耀东 黄英金 何宽信 王志彬 李立新 刘在强 肖文俊 摘 要 本研究探明了苯乙酸 (PAA)对烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的效应，发现PAA与 NAA、6-BA配合使用能有效促进 一 步成苗的发生。试验证明PAA对一步成苗的促进效应与各种激素浓度配比和基本培养基的种类有关 ，与基 因型的关系不明显 。 烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的最佳培养基配方为MS+ PAA 20mg／L+NAA 0．5mg／L+6-BA 1．0mg／L+谷氨酰胺 50mg／L+麦芽糖 30g／L。试验还证明，与 2，4-D诱导产生愈伤组织途径的多级成苗培养相 比，本研究建立 的PAA一步成苗培养 具有 以下优点：1)显著提高愈伤组织的诱导率 ；2)显著提高愈伤组织的质量，有效提高愈伤组织分化率 ；3)成苗率显著高于多级成 苗；4)再生植株具有更好的幼苗素质 ；5)再生植株的染色体数 目变异率也显著低于多级成苗 ；6)获得双单倍体植株 的频率显著高于 多级成苗；7)能有效缩短培养周期、节约成本。 关键词 ：苯乙酸 单倍体植株 体细胞组织培养 一步成苗 中图分类号 ：S572．035．2 文献标识码：A 文章编号：1004—5078(2004)02—0027—08 自从 1967年 Bourgin和Nitsch成功地从烟草花 满意的方法。目前较常用的是单倍体植株体细胞培养 药培养获得单倍体植株 以来 ，国内外广泛开展了烟草 加倍法，该法一般是以单倍体植株叶脉切段为外植体， 花药培养研究工作 ，成功研制出了几种简化的高效成 经脱分化培养诱导愈伤组织，然后将愈伤组织转入分 苗培养基 ，如烟基 1号、2号、3号等；并将花药培养技 化培养基产生再生植株 ，采用该法获得双单倍体植株 术应用于育种实践，育成 了如单育 1号、2号、3号及 的频率一般可达 5O 左右[1]。但这一方法也存在较高 Mcl01、F106、F107、筑波 1号等新 品种 。花培育种与 频率的无性系变异 ，培养时间长、手续较烦杂等不足。 常规育种方法相 比较具有加快基因型纯合、缩短育种 苯乙酸 (phenylaceticacid，PAA)是一种天然存在 年限、提高选择效率等优越性 [1]。 的植物生长素，其活性比IAA(Indole一3一aceticacid)和 但 目前烟草花培育种也还存在亟待解决的问题， NAA (Naphlhaleneaceticacid)都要弱得多_3]，但在高 其中最为突出的是单倍体植株染色体加倍获得双单倍 等植物中存在的浓度却比IAA高出4～6倍 [4]。Gudu 体的频率不高，从而影响了花培育种广泛应用。烟草单 等 [c观察到 Hordeumbulbosum 的花药愈伤组织在含 倍体植株染色体加倍的传统方法是用秋水仙碱处理， 有PAA 的诱导培养基上直接分化根芽的现象。卓丽 该方法的加倍成功率较低，一般在 3O 左右 。并且秋 圣等__6将PAA应用于水稻花药培养，发现该生长素与 水仙碱加倍处理后易导致染色体和基因的不稳定及产 2，4-D相 比能显著提高水稻花药愈伤组织分化率和提 生较高频率的多倍体和混倍体[2]，因而不是一种令人 高植株再生率 ，并同时发现该生长素能有效地促进水 稻花药愈伤组织在诱导培养基上直接分化成苗，从而 *彭耀东，男 ，26岁，硕士，从事烟草遗传育种及栽培生理研究，江西 简化培养手续并缩短成苗周期。尢为重要的是，PAA 省烟叶科学研究所 ，南昌 330045 是一种天然的弱活性植物生长素类物质，和人工合成 黄英