2015年普通微生物第十章微生物与基因工程.pptVIP

M13噬菌体载体 克隆能力较小 300~400bp 特别适合用于制备单链DNA模板、单链DNA探针、定位诱变模板 五、噬菌粒载体(phagemid/phasmid) 又称噬粒，由噬菌体M13的基因间隔区和质粒载体共同构建的载体 pUC118 将野生型M13的基因间隔区插入质粒载体 pUC18构建而成 在宿主细胞内以质粒形式存在，产生双链DNA；当辅助噬菌体M13感染宿主细胞后，以滚环方式复制，产生单链DNA 特点： 分子小 容量大 10kbp 可制备单链或双链DNA，克隆和表达外源基因 几类大肠杆菌克隆载体比较 载体类型 克隆容量 主要用途 质粒载体 15kbp 克隆和表达外源基因， DNA测序 λ噬菌体载体 23kbp 构建基因文库和cDNA文库 柯斯质粒载体 45kbp 构建基因文库 M13载体 300~400bp 制备单链DNA，定位诱变，噬菌体展示 噬菌质粒载体 10kbp 制备单链或双链DNA，克隆和表达外源 基因 六、真核生物的克隆载体 1.酵母质粒载体 利用酵母的2μm质粒和其他染色体组分与pBR322构建而成，为穿梭质粒 附加体质粒（episomal plasmid) 复制质粒(replicating plasmid) 整合质粒(integrating plasmid) 附加体