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第 29 卷第 3 期 大 连 工 业 大 学 学 报 Vol . 29 No . 3
2 0 1 0 年 5 月 Journal of Dal ian Polytechnic University May 2 0 1 0
文章编号 (20 10) 030 17 104
RACE 技术对薯蓣皂苷糖苷酶基因cD NA 3 ′末端的快速扩增
骆 宁 , 金 凤 燮 , 鱼 红 闪
( 大连工业大学 生物与食品工程学院 , 辽宁 大连 116034 )
摘要 : 对微生物 A bs i d i a sp . G3d 产薯蓣皂苷糖苷酶基因 cDN A 3′末端的序列进行了调取 。根据薯蓣
皂苷糖苷酶基因的 CD S 区已知序列设计特异性引物 ,应用 3′RA CE ( RapidAmplification of cDN A 3′
Ends) 技术 ,快速扩增得到 cDN A 3′端未知序列片段 ,将 PCR 产物切胶 回收 ,直接测序得到长度为
258 bp 的产物序列 ,经 比对其中编码区长度为 122 bp , 非编码区长度为 136 bp , Poly A 部分长度为
28 bp 。这对其他类中草药高活性皂苷糖基水解酶基因 cDN A3′末端的序列的调取提供了参考 。
关键词 : 薯蓣皂苷糖苷酶 ;3′RA CE 技术 ;PCR
中图分类号 : Q781 文献标志码 : A
Rapid a mpl if ication of 3 ′cD NA ends of dioscinglycosidase
by 3 ′RACE technique
LUO Ning , J IN Fengxie , YU Hongshan
( School of Biological Food Engineering , Dalian Polyt echnic Univer sity , Dalian 116034 , China )
Abstract : 3 ′End gene sequence of cDN A f ro m dio scinglyco sida se wa s st udied . The 3 ′sequence of
Dio scinglyco sida se wa s amp lified f ro m t he know n serie s of CD S in t he DN A of Dio scinglyco sida se
and t he t echnolo gy of 3 ′RA CE ( RapidA mp lification of cDN A 3 ′En ds) wa s u sed . The sequence lengt h
is 258 bp , in which t he encoding region is 122 bp and nonencoding region is 136 bp with 28 bp Poly A .
Key words : dio scinglyco sida se ; 3′RA CE ; PCR
0 引 言 基薯蓣皂苷元 。
cDN A 末端快速扩增技术 即 RA CE 技术
穿龙薯蓣 ,味苦性平[ 1 ] ,含有丰富的薯蓣皂苷
( RapidA mp lificatio
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