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知识点4 载体——“分子运输车” 1.载体。 将外源基因送入细胞经常用质粒作为载体。质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 2.载体使用的目的。 载体使用有两个目的:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到受体细胞中去;二是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 3.作为载体的条件。 作为载体必须具备三个条件: ①在受体细胞中能保存下来并能大量复制。 ②具有多个限制酶切割位点,而且每种酶的切割位点最好只有一个。 ③有特殊的遗传标记基因,便于进行筛选。一般来说,天然载体往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对载体进行人工改造。现在所使用的质粒载体都是经过改造的。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 4.载体的种类。 现在所用的载体主要分为两类:一类载体是细菌细胞质的质粒,质粒可以通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移,也可以独立复制,或整合到大型染色体DNA分子中,随染色体DNA的复制而同步复制。另一类载体是病毒,包括植物病毒、动物病毒和细菌病毒(噬菌体)。现在人们还在不断寻找新的载体。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 例4 下列有关质粒的叙述,正确的是( ) A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状的细胞器 B.质粒是细菌细胞中能自主复制的单链环状DNA分子 C.质粒的存在对宿主细胞的生存有决定性的作用 D.质粒与染色体中均含有脱氧核糖 知识梳理 典例剖析 栏目链接 * 专题1 基因工程 第1节 DNA重组技术的基本工具 知识梳理 典例剖析 栏目链接 一、基因工程的概念 1.手段:通过体外____________和____________等技术,赋予生物以新的____________。 2.目的:按照人们的愿望进行严格的设计,创造出更符合人们需要的新的________和____________。 3.设计和施工水平:____________水平,因此,基因工程又叫做DNA重组技术。 DNA重组 转基因 遗传特性 生物类型 生物产品 DNA分子 知识梳理 典例剖析 栏目链接 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀”(又称限制酶)。 (1)来源:主要是从____________中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的______________断开,因此具有________性。经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:__________和________。 原核生物 磷酸二酯键 专一 黏性末端 平末端 知识梳理 典例剖析 栏目链接 前者是限制酶在它识别序列的______________将DNA的两条链切开产生的,后者是限制酶在它识别序列的____________切开产生的。 中心轴线两侧 中心轴线处 知识梳理 典例剖析 栏目链接 2.DNA连接酶——“分子缝合针”。 (1)作用:将______________“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的______________,形成重组DNA分子。 (2)种类。 ①E·coli DNA连接酶:只能缝合DNA片段的____________。 双链DNA片段 磷酸二酯键 黏性末端 知识梳理 典例剖析 栏目链接 ②T4DNA连接酶:既可缝合DNA片段的黏性末端,又可缝合DNA片段的________,但连接后者的效率________。 3.运载体——“分子运输车”。 (1)作用:携带__________进入受体细胞。 (2)种类:质粒、__________的衍生物、动植物病毒等。 (3)特点。 平末端 低 外源基因 λ噬菌体 知识梳理 典例剖析 栏目链接 ①能够在受体细胞中进行__________,或整合到____________上,随染色体DNA进行同步复制。 ②有一个至多个__________切割位点,供外源基因插入。 ③具有特殊的________________,供重组DNA的鉴定和选择。 自我复制 染色体DNA 限制酶 遗传标记基因 知识梳理 典例剖析 栏目链接 知识梳理 典例剖析
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