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不同日龄蜜蜂对茶花粉和油菜花粉中主要矿物质消化率的研究 杭晓波 王颖 马兰婷 胥保华* 摘 要：本试验以意大利蜜蜂为研究对象，通过去直肠法研究不同日龄意大利蜜蜂对油菜花 粉和茶花粉中铜、铁、锰、锌、钠、钾、钙及镁八种矿物质的消化利用率，以及两种花粉饲 粮对蜜蜂采食量、中肠组织形态、抗氧化及消化酶活性等指标的影响，探讨日龄和饲粮两种 因素对蜜蜂矿物质消化率的影响。结果表明，蜜蜂对花粉中主要矿物质的消化率因花粉种类 和蜜蜂日龄的不同而存在差异；蜜蜂日龄和花粉种类影响蜜蜂机体的抗氧化能力、中肠蛋白 酶活性和中肠组织结构。 关键词：意大利蜜蜂；花粉；矿物质；消化率；日龄 花粉和花蜜富含丰富的矿物质，是蜜蜂发育和维持生命活动的天然饲粮来源[1-2]，蜜蜂 与其它动物一样，自身不能制造矿物质，必须全部从饲粮中摄取，花粉是蜜蜂矿物质的主要 来源[4] 。矿物质不仅构成蜜蜂的体成分，而且参与蜜蜂机体内酶、激素、矿物质和维生素的 合成与代谢。因此，充足的矿物质对于保障机体的正常生理机能和健康非常重要[5] 。以往对 蜜蜂营养需要的研究主要集中在蛋白质和脂类的需要量上，而对矿物质需要量的研究甚少。 矿物质是蜜蜂生命活动不可缺少的物质，它们共同作用来调节蜜蜂机体的代谢和生长。本试 验以刚出房（1 日龄蜜蜂）的意大利蜜蜂为试验动物，研究不同日龄意大利蜜蜂对油菜花粉 和茶花粉中主要矿物质消化率的影响，为蜜蜂饲料矿物质营养价值评定、蜜蜂饲料配制和原 料选择提供依据和参考，以期为蜂农合理补饲、适时脱粉提供指导，从而提高养蜂生产的经 济效益。 1 材料与方法 1.1 试验动物 本地意大利蜜蜂 1.2 试验分组与饲养管理 从姐妹蜂王蜂群中取 1 日龄蜜蜂2160 只，随机分成分为 3 个处理组，每个处理组 12 盒蜂（22.5cm╳4.5cm╳9.5cm ），每盒 60 只蜜蜂，于恒温恒湿培养箱（32℃，60%RH ）中 进行饲喂。其中一个处理组为对照组，饲喂糖水和去离子水，其他两个处理组为试验组，分 基金项目：公益性行业（农业）科研专项经费项目（200903006 ）；现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-45) 作者简介：杭晓波（1985-），硕士研究生，主要从事蜜蜂营养与饲料研究，E-mail: 331670291@ *通讯作者：胥保华，教授，博士生导师，E-mail: bhxu@ 别饲喂油菜花粉和茶花粉。每天早、晚各检查蜂盒一次，保证蜜蜂具有充足的糖水和水供应。 1.3 测试指标 1.3.1 采食量 记录每次喂料的料重，统计各蜂盒整个试验期的总取适量。总取适量除以蜂盒内蜜蜂个 数即为每只蜜蜂试验期的采食量。 1.3.2 消化率 饲粮配制完成后，取样测定饲粮中矿物质含量，根据采食量数据计算出每个重复蜜蜂花 粉饲粮中总矿物含量。在第 3 d、6 d 及 9 d 取出各重复中余料，并用原子吸收法测定余料中 矿物总量。各组蜜蜂饥饿 3 天后取直肠，原子吸收法测定直肠中矿物总量。由空白组各重复 蜜蜂直肠矿物质含量除以该重复蜜蜂数目计算不采食情况下每只蜜蜂直肠矿物质的含量。 矿物质消化率（% ）= （食入日粮矿物质的量-直肠矿物质的量+空白矿物质的量）/食入 日粮矿物质的量×100% 1.3.3 头胸部抗氧化性 分别对 3 日龄成蜂、6 日龄成蜂和9 日龄成蜂头胸部进行抗氧化性能测定。 各日龄分别取 5 只蜜蜂的头胸部称重，按照质量体积比 1：9 加入生理盐水制备成 10% 的组织匀浆，3000r/min 离心 10min，取上清液待测。 T-SOD 采用 T-SOD 试剂盒 A001-1 （南京建成生物工程研究所）测定。MDA 采用 MDA 试剂盒 A003-2 （南京建成生物工程研究所）测定。 1.3.4 中肠蛋白酶活性和组织结构 分别在第 3 d、6 d 及 9 d 取蜜蜂 10 只，解剖取其中肠置于装有 100 µl Tris-HCl (pH 7.9) 的Eppendorf 管中，-80℃中保存。 测定时每个Eppendorf 管加900µl Tris-HCl (pH 7.9)，用匀浆机粉碎中肠，并于4 ℃、10000 rpm 下离心 5 min ，取上清液20 µl 用于测定蛋白酶活性（牛勃, 2007 ）。用酶标仪(BioTek) 在 660nm 处比色，中肠蛋白酶活性用吸光光度值 OD660 表示。