分光光度法测定羟基自由基捕获剂的研究进展.pdfVIP

第 40卷 ，第 3期 安 徽 化 212 I Vo1．40，No．3 1Q 2014年 6月 ANHUICHEMICAL INDUSTRY ．1un．2014 分光光度法测定羟基 自由基捕获剂的研究进展 任瑞妮，付柯，冯 巩，何 舜，王 宏 (陕西理工学院化学与环境科学学院，陕西 汉中 723001) 摘要：主要介绍了分光光度法测 ·OH用二甲基亚砜 (DMs0)、茜素紫、邻二氮菲、水杨酸、亚甲基蓝、细胞色素C和溴邻苯三酚红等捕获剂 的适用环境，并评价了其优缺点。 关键词：分光光度法；羟基 自由基；捕获剂 doi：10．3969~．issn．1008-553X．2014．03．006 中图分类号：0657-3l 文献标识码 ：A 文章编号：1008—553X(2014)03—0019—03 羟基 自由基(·OH)具有强氧化性，主要调控生物体 性关系。同时还测定了核桃、黑芝麻等8种食物的提取 内的动态平衡。但是如果新陈代谢时羟基 自由基 (·OH) 物对 O·H的清除作用。该法操作简便 ，试剂价廉易得，实 生成过多，会在生物体 内氧化细胞膜、蛋 白质和酶等各 验结果准确可靠 ，灵敏度较高。在研究体外羟基 自由基 类生物大分子 ，导致细胞氧化、衰老、凋亡 ，对细胞进行 的生成含量以及其清除剂的筛选等领域有较为广泛的 致命性伤害。故近年来对各种抗氧化性物质研究甚多。 应用。 由于 ·OH寿命短(小于 10S)，存在浓度小，紫外分光光 1．2茜素紫法 度计无法直接测定的缺陷，故用捕获剂对其进行追捕， 茜素紫作为一种指示剂，在强酸介质中呈现黄色， 转化为易于?’贝0定的物质，然后进行间接测定。 微酸性介质中呈玫瑰红色 ，中性介质中呈淡紫色 ，强碱 目前 ，一般实验室采用分光光度法检测羟基 自由 性介质中呈紫色再变为黄色。Co+H：0反应生成羟基 基，虽然这种方法干扰因素较多，但简单实用，所需设备 自由基 ，茜素紫与 ·OH发生氧化还原反应后，可以使茜 常见。分光光度法测定羟基 自由基是利用 ·OH容易攻击 素紫颜色淡化甚至褪去，吸光度值逐渐减小。加入清除 芳环化合物而产生羟基化合物的特点，在体系中加入一 剂后，吸光度值下降的速率变小 ，利用这一特性可间接 些探针性物质，利用生成物的量，即体系反应颜色的变 测定清除剂的清除作用。 化来间接测定 ·OH的含量I”。捕获剂对羟基 自由基乃至 张瑞菊 等在波长为560rim时，利用从陈皮中提取 于生物体内多种 自由基的有效捕获，将不止在仿生界， 的黄酮类物质，在弱碱条件下来清除CoSO和H20反 其在环境治理方面也会有重要价值。因此，对捕获剂灵 应生成的 ·OH。茜素紫的颜色随着黄酮类物质浓度的减 敏度以及适宜条件的研究有重大意义。 少而变淡 ，从而得出了陈皮中的黄酮类化合物具有 良好 1羟基 自由基的捕获方法 的抗氧化活性的结论。该法选择性高，而茜素紫的颜色 1．1二 甲基亚砜法 变化程度、反应速度与Fe 以及 H0 的浓度成较好的 二甲基亚砜 (DMSO)作为一种常见的溶剂 ，在 线性关系。因此 ，需进行最佳操作方案的选择。故灵敏度 Fenton反应中作为羟基 自由基探针，使 ·OH转化为 甲基 高，且准确快速f51。这种方法对羟基 自由基清除剂的选择 亚磺酸l21。 具有一定的准确性。 在此反应中，甲基亚磺酸(MSA)能以稳定的状态存 1．3邻二氮菲法 在。由于被测溶液在反应前的MSA含量为零，故生成的 在pH=2～9时，邻二氮菲与+2价亚铁离子(Fen)发 MSA与羟基 自由基含量有一定的关系。徐向荣[31等以 生显色