左旋肉碱对大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用.pdfVIP

中文摘要 左旋肉碱对大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用 摘 要 目的：缺血性脑血管疾病是严重危害人类健康的常见病和多发病，已 成为国家、社会和家庭的沉重负担，对缺血性脑损伤防治的研究具有重要 的现实意义。文献报道左旋肉碱(LC)具有显著的神经保护作用，可用 于缺血性脑损伤和神经退行性疾病的治疗，但确切作用机制尚不清楚。本 文研究目的在于观察LC对大鼠缺血性脑损伤的保护作用，并探讨其可能 的机制。 方法： 1．观察LC对局灶性大鼠脑缺血的保护作用：采用改良的线栓大鼠 大脑中动脉的方法制作大鼠缺血模型，计算脑梗死体积百分比，观察LC 对此模型的脑缺血保护作用。 2．MTT法检测LC预作用24h后对低糖低氧损伤PCI2细胞活力的 改变：PCI2细胞培养于含RPMI1640完全培养基的培养瓶，置于37℃， 细胞用连二亚硫酸钠合并低糖培养基建立体外细胞低糖低氧损伤模型。96 孔板中的各组细胞每孔加入MTT(5 h，每 mg／mL)100肛L，37℃孵育4 孔各加DMSO nm波长处测吸光度(OD 200肚，然后在酶标仪上于570 值)。 亡细胞百分比用凋亡细胞数占总细胞数比值求得。 4．用酶化学法测定LC预作用24h后低糖低氧诱导的PCI2细胞丙二 醛(MDA)的变化：观察LC对低糖低氧损伤的P12细胞的保护作用。 5．测定LC预作用24 h后低糖低氧诱导的PCI2细胞超氧化物歧化酶 结果： 1．LC能明显降低局灶性脑缺血大鼠的脑梗死体积百分比。 脑组织切片染色结果表明，大鼠大脑中动脉缺血模型后6h，模型组 的大鼠患侧半球大脑中动脉供血区软化、苍白。LC组的患侧半球软化、 中文摘要 苍白区缩小。线栓法致大鼠局灶性脑缺血模型组脑组织脑梗死体积百分比 表明LC能明显降低缺血大鼠的脑梗死体积百分比。 2．LC对低糖低氧所致的PCI2细胞损伤具有保护作用。 h 与正常细胞相比，连二亚硫酸钠合并低糖培养基诱导PCI2细胞24 后损伤组细胞活力下降。损伤细胞对MTT的摄取能力明显降低，即在570 LC预作用24h后细胞的活力增 nm处的光密度显著降低。经100～600肛M 加，连二亚硫酸钠造成低糖低氧损伤模型的细胞MTT光密度值不同程度 提高。 3．LC抑制低糖低氧所致的细胞凋亡。 SYTOX染色结果表明模型组凋亡细胞数明显多于正常组，模型组凋 和400 至2．44％4-0．93％和2．39％4-1．27％(P0．01，n=4)。 4．LC降低低糖低氧损伤PCI2细胞的MDA含量。 4-O．20 低糖低氧损伤的PCI2细胞匀浆MDA活性为1．04 nmol／mg 4-0．10 protein，与对照组0．49nmol／mgprotein相比明显升高(尸0．05， 4-0．04 nmol／mg 5．LC增强低糖低氧损伤PCI2细胞的SOD活性。 4-1．14 PCI2低糖低氧损伤细胞SOD活性为7．17