ShRNA沉默Lox12基因对人胰腺癌PANC-1细胞影响及其可能机制探讨.pdf

Loxl．2对胰腺癌细胞生物学行为的初步研究 中文摘要 【目的】 研究shRNA沉默Loxl．2基因的表达自订后对人胰腺癌PANC．1细胞株细胞中 mRNA的表达情况，以探讨关于Loxl．2基因在 Loxl．2、E．cadherin、snail及mmp9 胰腺癌细胞的侵袭机制，和增殖迁移及对化疗药物敏感性的影响，初步评价Loxl2 基因治疗胰腺癌的应用前景。 【方法】 用shRNA沉默人胰腺癌PANC．1细胞株细胞中Loxl．2基因的表达，用实时定 mRNA的表达变化；用细胞迁移实验观察沉默Loxl一2前后胰腺癌细 snail及mInp9 胞的迁移能力；用MTT法检测沉默Loxl2基因6仃后化疗药物对胰腺癌细胞的抑制性。 【结果】 shRNA组、阴性 l、ShRNA沉默L0x1．2前后人胰腺癌PANC．1细胞株细胞，Loxl．2 对照组和未干扰组细胞比较：Loxl．2mRNA表达明显降低，基因沉默明显，同时 Loxl．2 mRNA的表达比阴性对照组和未干 shRNA组的E．cadherin、snail及mmp9 shRNA组、阴性对照组和未干扰组细胞之间差异均有统 扰组细胞明显减少。Loxl．2 计学意义(尸0．05)，不同处理组之间差异亦有统计学意义(JP0．05)。 shRNA组、阴性对照组和未干扰组细胞比较，未干扰组细胞迁移能力最强，而转染 Loxl．2shRNA组迁移能力最弱。 3、ShIⅢA沉默Loxl．2后人胰腺癌PANC．1细胞株对四种化疗药物都敏感，其中紫 杉醇对人胰腺癌PANC．1细胞株最明显，5．如对Loxl．2shIⅢA组、阴性对照组、脂 质体组、和未干扰组细胞的抑制率，24h分别是79．19％、37．56％、31．82％、21．85％； 扰组细胞的抑制率，24h分别是77．06％、26．18％、26．19％、34．11％；48h分别是 86．09％、84．93％、 89．58％、62．81％、63．45％、 83．Ol％和38．89％；72h分别是 和40．76％；DDP对Loxl-2slⅡ矾A组、阴性对照组、脂质体组、和未干扰组细胞的 83．01％和38．89％；72h分别是89．58％、62．81％、63．45％、和40．76％；紫杉醇 对Loxl．2shRNA组、阴性对照组、脂质体组、和未干扰组细胞的抑制率，24h分别 是85．40％、83．24％、80．48％、79．90％；48h分别是90．08％、90．55％、82．24％和 shRNA组之间差异均有统计学意义(PO．05)，不同处理组之间差异亦有统计学意义 (尸0．05) 【结论】 Loxl．2基因在胰腺癌中可能与癌细胞的侵袭转移有密切关系，其可能机制是通 过Loxl．2、 说可能与药物敏感性有密切关系，shRNA沉默Loxl一2后化疗药物对人胰腺癌 PANC．1细胞株抑制性明显增强，Loxl．2可能成为胰腺癌癌治疗的一个靶点。 【关键词】Loxl一2；基因沉默；Panc．1 2 ABSlKACl 【0bjective】 TOobservethe ofLoxl一2 mRNA expression mRNA，E—cadherinmRNA，mmp9 for andaRerLoxl·2silenceedinPANC一1 aIldsnailmRNAbefore gene people to Loxl一2 ontheattackin cancerceUlines，