关白附中1,6-葡聚糖及其硫酸酯的抗补体活性 Anti-complementary Activities of a (1→6) Linked Glucan from Korean Mondshood Root and Its Sulfated Derivatives.pdfVIP

Vol.35 高等学校化学学报 No.7 2014年7月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 1423~1426 doi:10.7503/cjc 关白附中1,6-葡聚糖及其硫酸酯的抗补体活性 1,2 1 2,3 1 1 1 2,3 李晓军 ,蒋嘉烨 ,施松善 ,栗 源 ,江永波 ,可 燕 ,王顺春 (1. 上海中医药大学教学实验中心,2. 中药研究所,中药标准化教育部重点实验室, 3. 上海中药标准化研究中心,上海201203) 摘要 为研究关白附多糖及其硫酸酯的经典途径抗补体活性,以关白附[Aconitumcoreanum(Lévl. )Raipaics] 为原料,经水提醇沉、DE-32、Superdex-200 和 Superdex-75 凝胶柱分离纯化,得到 1个均一的中性多糖 KMPS-2A. 采用高效凝胶渗透色谱法、 甲基化、核磁共振和红外光谱等手段对KMPS-2A的结构进行了鉴定; 采用氯磺酸吡啶法制备了多糖硫酸酯,并测定了多糖及硫酸酯的抗补体活性. 结果表明,KMPS-2A的平均 5 相对分子量为6.76×10 ,结构为α-1,6-D-Glc链接的线性多糖;在氯磺酸与吡啶的体积比为 1.75：1.0时制 备的多糖硫酸酯1.75B的取代度最高为1.79. 碳核磁谱分析结果表明,硫酸基团先后取代C2,C3及C4位. 该多糖硫酸酯的抗补体活性与其硫酸基团取代度呈现一定的相关性,多糖硫酸酯1.75B的经典途径抗补体 活性优于阳性对照药肝素,表明其具有开发成为补体抑制剂的潜力. 关键词 多糖;关白附;补体 中图分类号 O629.12 文献标志码 A 关白附为毛茛科乌头属植物黄花乌头[Aconitumcoreanum(Lévl. )Raipaics]的干燥块根,是一种传 [1] 统的中药 ,可用于治疗胃灼伤、心疼、 口眼歪斜、癫痫、婴儿惊厥、破伤风和风湿性关节炎等疑难杂 [2,3] 症 ,其提取物具有治疗心律不齐、止痛和抗炎的作用. 补体系统非正常激活会引起系统性红斑狼疮 [4,5] [6] 和风湿性关节炎等疾病 . 目前,天然产物多糖类及其衍生物补体抑制剂的研究备受关注 . 研究 发现,茶多糖硫酸酯可增强对经典补体途径的抑制作用, 同时对补体系统的激活具有靶向抑制作 [7] [8] 用 ;刺山柑多糖硫酸酯明显提高了经典补体途径的抑制作用 . 本文从中药关白附中分离纯化出均 一多糖,并对其结构进行鉴定,同时制备了其多糖硫酸酯,并研究其经典途径抗补体活性,进而得到 具有补体抑制剂潜能的关白附多糖硫酸酯,为补体系统非正常激活引起的疾病用药提供了参考. 1 实验部分 1.1 试剂与仪器 关白附饮片购于上海康桥中药饮片厂并由上海中医药大学教学实验中心可燕教授鉴定为Aconitum coreanum(Lévl. )Raipaics 的干燥块根;DE-32,Superdex-200和Superdex-75 凝胶柱为美国 GE公司产 品;单糖标准品和二甲亚砜(DMSO)等试剂均为Sigma公司产品;肝素钠购于上海国药集团化学试剂 有限公司(批号:效价/U/mg≥150.0); 补体从健康豚鼠血液中获得;溶血素购自上海国 药集团化学试剂有限公司(批号:. Agilent1100series 高效液相色谱仪;KS-805及 KS-804 型色谱柱(日本Shodex 公司);Br