光镊拉曼光谱法分析红法夫酵母内虾青素含量 Analysis of Astaxanthin in Phaffia Rhodozyma Using Laser Tweezers Raman Spectroscopy.pdfVIP

第32卷，第9期 光谱学与光谱分析 2 01 and 2年9月 SpectroscopySpectra[Analysis September，2012 光镊拉曼光谱法分析红法夫酵母内虾青素含量 王 雪1’2，孙美娟1’2，刘军贤1，邓洋鸽1，莫玉香1，陶站华孙 1．广西师范大学物理科学与技术学院，广西桂林541004 2．广西科学院生物物理实验室，广西南宁530007 摘 要建立一种用激光镊子拉曼光谱法快速定量红法夫酵母细胞内虾青素含量的方法。测定不同浓度虾 520 青素标准品溶液的拉曼光谱，取其1 cm_1峰峰高绘制虾青素标准曲线；取不同氮源、碳源的红法夫酵母 细胞，一部分用激光镊子拉曼光谱法测定，一部分用紫外一可见分光光度法测定；最后分析两者间的相关性。 结果表明虾青素标准曲线的相关系数到达0．9983。在单位质量红法夫酵母虾青素含量与单位体积红法夫酵 母发酵液虾青素产量方面，对比激光镊子拉曼光谱法与紫外一可见分光光度法，两种方法所得数据具有良好 7和0．905 的相关性，其相关系数分别达到0．917 4，表明激光镊子拉曼光谱法能够达到紫外一可见分光光度 法的测定效果，是定量分析红法夫酵母细胞内虾青素的更有效方法。 关键词光谱学；激光镊子拉曼光谱；红法夫酵母；虾青素 文献标识码：A 中圈分类号：0657．3；Q93—3 拉曼光谱法是一种通过用激发光照射目标物，收集其内 引 言 部分子对激发光的散射光谱，从而判断目标物内分子结构及 含量的方法。与传统的生物检测法相比，拉曼光谱法无需样 虾青素是一种位于红橙色带的类胡萝卜素，具有极强的 品预处理，简洁，快速，且对样品无损，可实现样品的实时 抗氧化性，摄入虾青素有利于减缓衰老，降低某些癌症和心 监测。 血管疾病的风险，并增强对病毒、细菌、真菌的免疫力，减 近年来，拉曼光谱技术已被广泛应用于生物领域，如疾 少寄生虫感染的可能性[14]。此外，它为一些鸟类，甲壳类，病判断[9]，微生物鉴定[1…，细胞成像[11]等方面。传统的共焦 鲑鱼类提供了主要色素[5]，因此，虾青素在制药，食品保健， 显微拉曼光谱法在测定时需要采用物理或化学方法将靶细胞 饲料工业等方面都有广泛需求。 固定，这易使靶细胞失去活性。而结合了光镊技术的激光镊 tweezersRaman 相比于化学合成的虾青素，天然虾青素安全性更高，也 子拉曼光谱法(1aser 更具市场前景。而红法夫酵母能发酵多种糖类合成虾青素， 为在培养基中分析单个、运动的活体细胞提供了可能。光镊 且生长速度快、生长条件温和，因此，用红法夫酵母生产虾 是利用高汇聚的激光束囚禁目标物，以达到在溶液中将其固 青素一直受到人们的广泛重视。但红法夫酵母虾青素产量偏 定的效果。这一技术使拉曼光谱分析的细胞更接近其自然生 低，不能满足工业化生产需求，现今人们已在菌株选育及生 理状况，降低了细胞运动时产生的不确定性，减少了杂光的 2|， 长条件优化方面做了大量工作[6’7]，为了检测选育和优化效干扰，提高了信噪比。因此，LTRS已广泛应用于癌细胞[1 果，势必需要一种快速、高效、灵敏的检测手段。传统的检 孢子[1“，线粒体[14]等生物样品的研究。 测方