基因工程操作程序3.pptVIP

基因工程操作程序 位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质，但启动子本身不被转录 2、将目的基因导入动物细胞 （1）方法：显微注射法 （2）程序： 微生物细胞 Ca2+处理 四、目的基因的检测与鉴定 检测: 是否插入目的基因 是否转录 是否翻译 鉴定: 功能活性鉴定 抗性鉴定 * 1、基因表达载体包括哪些必需组分？ 2、将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法分别有哪些？ 3、目的基因的检测有哪些方法？ 二、基因表达载体的构建——基因工程的核心 目的： 组成： 1、使目的基因在受体细胞中稳定存在，且可以遗传给下一代， 2、使目的基因能够表达和发挥作用。 它们各自的作用是什么? 目的基因+启动子+终止子+标记基因 启动子： 终止子： 位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来 标记基因： 有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。 寻根问底：将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这么做，结果会怎样？ 提示：有人采用总DNA注射法进行遗传转化，即将一个生物中的总DNA提取出来