1氨基酸的分离---纸层析法.pptVIP

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  • 2017-09-03 发布于重庆
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实验一 氨基酸的分离鉴定 ——纸层析法 【实验目的】 学习氨基酸纸层析法的基本原理 掌握氨基酸纸层析的操作技术 纸层析法属于分配层析,它是以层析滤纸为载体,以吸附于滤纸纤维羟基上的一层水(极性)为固定相,流动相是有机溶剂,主要是正丁醇(非极性溶剂)。分离氨基酸是根据不同氨基酸的极性,在固定相和流动相中的分配系数不同而进行分离的(依据相似相溶原理)。 【实验原理】 分配系数:K 两种溶剂A、B,一种溶质M,即可溶于A,也可溶于B。先将M溶于A中,然后加入B,这时A中的M将部分转 移到B中,当达到平衡时,只要温度不变,M分配于A、B 中的浓度Ca、Cb不会改变,两者的比值是一个常数K。K 被称为M在A和B中的分配系数。即K=Ca/Cb 它是描述物质在两相中行为的重要物理化学特征参数。 氨基酸被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf值(比移值)来表示的。 在一定的条件下某种物质的Rf值是常数。Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。 【实验器材与试剂】 1、层析缸 2、毛细管 3、喉头喷雾器 4、培养皿 5、层析滤纸(新华1号) 6、铅笔(直尺) 7、分液漏斗 8、吹风机 【实验步骤】 1、配扩

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