小平台水环境间断睡眠剥夺法复制大鼠失眠模型评价.pdfVIP

小平台水环境间断睡眠剥夺法复制大鼠失眠模型的 评价1 1 1 1 2 邱振刚 ，张洪斌 ，王世军 ，齐向华 1 山东中医药大学康复医学系，济南（250355 ） 2 山东中医药大学第一附属院，济南（250014 ） E-mail ：qzg_2002@163com 摘 要： 目的：小平台水环境间断睡眠剥夺法复制大鼠失眠模型的评价。方法：运用小平 台水环境间断睡眠剥夺法建立拟失眠大鼠模型，观察其对大鼠的自主活动；睡眠脑电反映的 睡眠时相；睡眠相关物质5-HT、NE 的影响。结果：模型组大鼠与与对照组比较：其自主活 动次数明显增多（P0.01 ）；睡眠时相WAKE 期时间明显延长，而TST 时间明显缩短(P0.05)； SWS 时间明显减少，其中SWS2 减少最为显著(P0.01) ，而SWS1 无明显变化；RMES 有所 增加，但无统计学意义(P ﹥0.05)。结论：小平台水环境间断睡眠剥夺法，可增加觉醒，减少 睡眠；增加大鼠的兴奋性；影响睡眠相关物质（5-HT、5-HIAA、NE ）的昼夜节律，使其分 泌失衡，使大鼠睡眠－觉醒紊乱，较好的模拟了失眠的病理状态。且此造模方法恢复期间可 多次给药，满足中药作用时间慢，治疗周期长，镇静催眠作用弱，注重“调理”而非强调“重 镇”的特点，能较好的适用于中药制剂治疗失眠的动物实验研究。 关键词：失眠；睡眠剥夺；造模 中图分类号：R256.23 1. 引言 失眠在我国发病率很高，危害性非常大，已引起人们的日益关注，关于睡眠和失眠的医 学研究也日益增多，如何治疗失眠已经是当今医学界一个非常关注的问题[1] 。近年来，中医 治疗失眠的研究，以临床报道居多，动物实验及药理研究开展得不够，往往缺乏对病因病机、 药物组成、疗效机制等进行深入系统的研究。这主要与目前尚缺乏令人满意的失眠动物模型 有关。目前常用的失眠动物模型大致有五种，分别为电刺激法(大鼠足休克动物模型) [2] 、轻 柔刺激法[3~5]、水上平台法[6~10]、强迫运动睡眠剥夺法[11~13] 、药物睡眠剥夺法[14~15] 。这些动 物模型主要采用研究睡眠生理和镇静催眠药的模型，它是依据西药起效快，镇静催眠作用强， 治疗周期短等特点设计的。多是经过各种方法对动物进行长短不等时间的睡眠剥夺后，一次 性用药，观测药物对实验动物行为、睡眠结构、睡眠相关生化物质等的影响来进行药物的研 究。而中药多为复合制剂，有作用时间慢，治疗周期长，镇静催眠作用弱，重在“调理”而非 在“重镇”等特点，所以现有的模型不太适合中药复方研究。据此我们首创“小平台水环境间 断睡眠剥夺法”，即睡眠剥夺24 小时然后恢复 24 小时，二者交替进行，共剥夺七次。以期 通过七次睡眠剥夺扰乱实验动物的睡眠节律，达到类似失眠患者睡眠节律紊乱的目的。此造 模方法恢复期间可多次给药，满足中药作用时间慢，治疗周期长，镇静催眠作用弱，注重“调 理”而非强调“重镇” 的特点，较适用于中药制剂治疗失眠的研究。 2. 实验材料 1.1 实验动物 健康雄性 Wistar 大鼠 20 只，体重 220～250g ，普通级，购自山东大学实验动物中心。 动物合格证号：鲁动质字号。 1 本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（项目编号：20040441022）的资助。 - 1 - 1.2 睡眠剥夺箱的制备[16] 睡眠剥夺箱为 51cm×36cm×20cm 的鼠箱，内置一直径6.5cm 的小平台或直径 15cm 的大 平台，周围是水环境，水深 3cm，平台在水面以上 1cm，于平台之上 16cm 处放笼罩，笼罩 以平行的不锈钢丝制成，上面放水和食物。水温和室温保持一致，每日换水并打扫实验箱。 1.3 实验器材 YLS-1A 多功能大鼠自主活动记录仪