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专题九:生物技术实践
【考情分析】
本专题内容包括选修一《生物技术实践》的全部内容。本部分内容在高考中以非选择题呈现的较多,多为二选一模式。本专题内容在高考中的主要考点有:微生物的培养基的配制、消毒、灭菌、计数分离等技术,尤其是培养和分离;传统发酵食品制作的原理、过程、条件控制;花药离体培养技术的操作及与植物组织培养的区别;植物有效成分的提取的原理、方法等;DNA、蛋白质的提取、分离的原理、方法与装置。
【知识网络】
【知识综合】
一、传统发酵技术的应用
1.几种传统发酵技术的比较
菌种生
活方式 原理 发酵条件 操作提示 果
酒 酵母菌
兼性
厌氧型 C6H12O6 →2C2H5OH+ 2CO2 温度:18~25℃,最适温度为20℃。
PH;5.0~6.0 呈酸性。
氧气:先期通O2,目的是使酵母菌大量繁殖,然后密闭发酵生产酒精。 选材和材料处理;防杂菌污染;控制发酵条件;正确使用发酵装置。 果
醋 醋酸菌
好氧型 C2H5OH+ O2→2CH3COOH+H2O 温度:30℃~35℃。前期和中期,不需通入氧气,目的是进行酒精发酵,接种后需保持氧气充足。 腐
乳 毛霉
需氧型 蛋白酶
蛋白质→ 多肽、氨基酸、脂肪酶
脂肪→甘油、脂肪酸 温度为15~18 ℃,此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长。 防杂菌污染;控制盐、酒、辛香料用量;控制前、后期发酵条件。 泡
菜 乳酸菌
厌氧性 在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料 防杂菌污染,
密封严密。 选择气密性好的泡菜坛;控制腌制条件。 二、微生物的培养及应用
1、消毒和灭菌的区别
使用方法 产生的结果 常用的方法 应用的范围 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物质表面或内部一部分对人体有害的微生物 煮沸消毒法 一般物品 巴氏消毒法 不耐高温的液体 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源等 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌 接种工具 干热灭菌 玻璃器皿、金属工具 高压蒸汽灭菌 培养基及容器的灭菌 2、微生物的纯化
(1)平板划线法:操作简单,但是单菌落不易分离
(2)稀释涂布平板法:操作复杂,但是单菌落易分离
3、微生物的分离和计数
(1)分离:选择培养基
(2)计数:常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
三、植物组织培养
1、原理:细胞的全能性
2、花粉植株的产生和植物茎的组织培养的比较
项目 月季的花药培养 菊花茎的组织培养 相同点 原理 细胞的全能性 过程 脱分化、再分化 不同点 操作流程 制备培养基—外植体消毒—接种—培养—移栽—栽培 选材—材料消毒—接种和培养—筛选和诱导—移栽—栽培选育 四、酵母细胞的固定化
(1) 包埋法:适合于较大的细胞
化学结合法
物理吸附法
(2)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较
方法 优点 缺点 直接使用酶 催化效率高、耗能低、污染低 对环境条件非常敏感、易失活;难回收,成本高,影响产品质量 固定化酶 既能与反应物接触,又能与产物分离;可以反复利用 不利于催化一系列的酶促反应 固定化细胞 成本低、操作容易 反应物不易与酶接近,尤其是大分子物质,反应效率下降 五:五种重要物质的提取
(1)提取方法总结
提取物质 提取方法 提取原理 步骤 DNA 盐析法 ①DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同;②DNA不溶于酒精,但某些蛋白质则溶于酒精 ①溶解在2mol/L的NaCl溶液中;②加水稀释至0.14mol/LNaCl溶液使DNA析出过滤;③加入冷却酒精析出。 血红蛋白 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小 ①样品处理;②粗提取;③纯化;④纯度鉴定 电脉法 根据各种分子带电性质差异及分子本身大小、形状的不同 玫瑰精油 水蒸气蒸馏法 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 ①水蒸气蒸馏;②分离油层;③除水过滤 橘皮精油 压榨法 通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油 ①石灰水浸泡、漂洗;②压榨、过滤、静置;③再次过滤 胡萝卜素 萃取法 使提取物溶解在有机溶剂中,蒸发后得到提取物 ①粉碎、干燥;②萃取、过滤;③浓缩 (2)DNA粗提取与鉴定
①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,不适于作DNA提取的材料,但却是提取血红蛋白的理想材料。
②实验过程中两次用到蒸馏水:第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次目的是稀释NaCl溶液。
③鉴定DNA加入二苯胺试剂并沸水浴加
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