用限制性酶切和Southern杂交对葡萄无核基因分子标记的分析.pdfVIP

用限制性酶切和Southern杂交对葡萄无核基因分子标记的分析.pdf

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业生物技术学报 Journal of Agricultural Biotechnology 2005,13 (): ·研究论文· 用限制性酶切和Southern 杂交对葡萄无核基因分子标记的分析* 1,2 1 1,3 1 1 1 克强 王跃进 * 张今今 王西平 万怡震 张剑侠 (1. 西北农林科技大学农业部西北园艺植物种质资源与遗传改良重点开放实验室,杨陵712100; 2. 山东农业大学林学院,泰安271018;3. 西师范大学生命科学院,西安7 10062 ) 摘要:对葡萄( )无核基因特异标5-564 6-1538 的DNA 序列进行了克隆和测序,其序 用 列全长分别为564 和1 538 bp ,GenBank 登陆号为AY327513 和AY3275 14。 Wingene23 1 DNA 分析软件5-564 6-1538 序列的限制性内切酶酶切位点进行了分析,可识别6 个碱基及其以上序列的酶切位点分别有30 和131 个; R 和 d 芋5-564 特异标记上没有酶切位点,而 R Ⅰ-6--1538 第 135 个碱基处有一个酶 切位点, d Ⅲ6--1538 上没有酶切位点。5-564 DNA 作探针对葡萄基因组DNA 作Southern 杂交, 结果在无核亲本红光无核及无核基因供给者无核白和无核杂种上出现杂交带,而且呈单拷贝,而在有核亲本红地球及有核杂 种上未出现杂交带,进一步证明5-564 特异片段来源于无核葡萄基因组,为检测和克隆葡萄无核基因提供了证 据。 关键词:葡萄; 无核基因; 限制性酶切分析; Southern 杂交 Analysis of the DNA sequences of molecular markers linked to grape eedlessness gene by restriction enzyme and Southern blotting YANG Ke-Qiang1,2 WANG Yue-Jin1 ZHANG Jin-Jin1,3 WANG Xi-Ping1 WAN Yi-Zhen1 ZHANG Jian-Xia1 ( ) DNA molecular markers linked to grape( L.) seedlessness gene:5-564 and6- 1538 derived from

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