抗CD3抗Pgp微型双功能抗体的构建和表达.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ()* + ! ,) +# 年 月 $%% ’ !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 -.*/ $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 抗 !#$ 抗%’ 微型双功能抗体的构建和表达 高瀛岱 熊冬生 许元富 彭 晖 邵晓枫 杨纯正 朱祯平 （中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所 实验血液学国家重点实验室，天津 %%%$% ） 摘 要 构建和表达抗 抗 微型双功能抗体，并测定该微型双功能抗体的生物学活性。采用 和 CDE FG FCH )I6J*9 方法构建抗 抗 微型双功能抗体，并用双脱氧终止法测定 序列；采用亲和层析法纯化该产物，并用 FCH CDE FG D,3 K6L@6JB ?*)@ 和分子排阻层析鉴定纯化产物；采用免疫荧光法、放射免疫分析法鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。 序列测定结果表明：抗 抗 微型双功能抗体已构建成功，表达可溶性产物的产量达 以上，纯化产 D,3 CDE FG $8GE M P P 物中二聚体的比例达 ，具有与 （ ）和 细胞（ ）结合的活性，与抗 及抗 % N -.JO9@ CD Q42$E3%$ FG CD R;SI FG R;SI 的亲合常数相当。成功地构建了抗 抗 微型双功能抗体，并获得高效表达，表达产物具有与相应二个靶抗 CDE FG 原结合的活性。 关键词 ， ，基因工程抗体，双功能抗体 CD FG 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） T’12 3 !%%%0%2! $%% %#0%###0%2 应用针对特异肿瘤抗原的单克隆抗体对肿瘤进 只能与另一顺反子上的 和 配对，从而形成二 (V (M 行治疗是肿瘤免疫疗法的重要组成部分。与传统化 聚体。通常使用的效应细胞主要有 细胞（ ， 5 CD$ 疗相比，单抗具有针对性强的特点，因此避免了对正 ）、 细胞（ ）、单核 巨噬细胞（ ）、树突 CD ,Q CD!