枣树基因组DNA提取及其RAPD体系优化.pdfVIP

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2017-09-03 发布于重庆
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安徽农业科学, , ( ): , 责任编辑王丽莉责任校对王淼 JournalofAnhuiAgri.Sci5102 枣树基因组DNA提取及其RAPD体系优化 * 李瑞环李新岗黄建高文海张亚利 , , , , 西北农林科技大学林学院国家林业局黄土高原林木培育重点实验室陕西杨凌 ( , ) 712100 摘要以不同生长期的枣和酸枣为研究对象采用法提取枣基因组通过单因素水平试验筛选模板、 2+ 酶、 , ; , 、 CTAB DNA 5 Mg Taq 和随机引物的浓度及其用量建立了枣和酸枣技术最优体系即反应体系中各组分含量为 dNTPs , RAPD , 25μl 10×TaqBuffer+KCl2.5 聚合酶模板引物为适宜的扩增程序为预 ; ; ; ; ; 。 : μlTaqDNA 0.04U/μlMgCl2.0mmol/L DNA2ng/μl 0.3μmol/LdNTP 0.2mmol/L 94℃ 2 变性 ; 循环变性 , 退火 , 延伸 , 个循环; 延伸。 5min94℃ 50s36℃ 50s72℃ 1.5min38 72℃ 10min 关键词枣酸枣基因组优化 ; ; ; DNARAPD 中图分类号文献标识码文章编号 ( ) Q28 A 0517-6611200717-05102-03 GenomicDNAExtractionandRAPDSystemOptimizationofChineseJujube , ! LIRuihuanetal (CollegeofForestry,NorthwestAFUniversity,YanglingShaanxi712100) AbstractGenomicDNAwasisolatedfromdifferentgrowthstagesofZiziphusjujubaMill.andZiziphusacidojujubaC.Y.usingCTABmethod. 2+andTaqDNApolymerasewereselectedbysinglefactorfiveleveltests.TheoptimumRAPD Contentanddosageoftemplate,primer,dNTPs,Mg systemsforZiziphusjujubaMill.andZi