电针水沟对脑出血大鼠大脑皮质NPY调节作用的动态观察.pdfVIP

电针水沟对脑出血大鼠大脑皮质NPY 调节作用的动 态观察1 孙国杰，杜艳军，孔立红 湖北中医学院针骨系，武汉（430061 ） E-mail ：sunguojie@ 摘 要：目的：观察 NPY 在大脑皮层神经细胞和内皮细胞中的表达，探讨电针水沟对脑出 血大鼠 NPY 调节作用的动态变化。方法：将健康青年 Wistar 大鼠随机分为正常组、假手术 组、模型 3h、24h 、72h 组、电针 3h、24h 、72h 组，每组各 10 只。采用胶原酶Ⅶ诱发的大 鼠尾壳核出血模型；电针组在诱导大鼠尾壳核出血模型的基础上，用 26 号、1 寸不锈钢毫 针电针“水沟” ，接 G6805 －II 电针治疗仪（空白电极接大鼠耳朵），连续波，频率 120 次⁄ min ， 强度 1mA，留针30min。造模麻醉醒后立即针刺 1 次，每隔 24h 再针刺一次，3 天后取材。 根据 Bederson 神经体征评分法进行综合等级评分，并采用免疫组化方法检测 NPY 在大脑皮 层神经元和内皮细胞表达。结果：（1 ）造模麻醉醒后模型组与电针治疗组的神经缺损体征 综合评分无明显差异（P ＞0.05 ），且电针治疗组的神经缺损体征略高于模型组。电针治疗组 经电针治疗后，其神经缺损体征综合评分逐时递减，与模型组比较有明显差异(p0.05 或 p0.01),与电针治疗前比较亦有明显差异(p0.01)。（2 ）正常组与假手术组大鼠大脑皮层神经 元和内皮细胞有少量的 NPY 阳性表达；脑出血后3h 大鼠大脑皮层NPY 的阳性表达开始增 高，24h 呈最高峰，胞浆和突起浓染呈棕褐色，血管内皮细胞细胞质中有棕色颗粒，72h 时 有所下降，与正常组比较均有显著性差异（P0.01 ）。电针组大鼠大脑皮层神经元和内皮细 胞的 NPY 阳性表达，也于3h 开始表达，于 24h 表达较高，72h 表达减弱，与模型组比较均 有显著性差异（P0.01 ），与正常组比较P0.05 。结论：电针水沟穴能有效抑制脑出血后3h、 24h 、72h 时大脑皮质神经元和血管内皮细胞NPY 的表达增强，改善脑出血大鼠的行为体征。 但提示脑出血后不同时间段 NPY 对血管内皮细胞的作用效应机制可能是今后脑出血防治研 究的新问题。 关键词：神经肽 Y ，脑出血，针刺疗法，水沟 近年来，越来越多的临床资料表明血肿扩大及其继发性脑损害才是导致病情加重甚至 死亡的主要原因，脑血管的舒缩功能则直接影响脑出血后血液的循环与调节。目前关于神经 肽 Y(NPY)在脑血管内皮细胞的作用研究较少，本实验将采用免疫组化方法，观察 NPY 在 大脑皮层神经细胞和内皮细胞中的表达，初步探讨电针水沟对脑出血大鼠脑血管神经调节的 动态影响。 1 材料与方法 1.1 动物与试剂 健康青年 Wistar 大鼠（湖北省医学科学研究院实验动物中心提供）80 只，体重 200～ 250g ，雌雄各半。查随机数字表，分为正常组（10 只）、生理盐水组（10 只）、模型组（30 只）、电针治疗组（30 只）。再依同样的方法将模型组、电针治疗组分别分为3h、24h 、72h， 3 小组，每组 10 只。SABC 试剂盒和兔抗大鼠 NPY 单克隆抗体购自武汉博士德生物工程有 限公司。 1.2 动物模型制作 [1] 采用胶原酶Ⅶ诱发的大鼠尾壳核出血模型 。动物经 6%水合氯醛腹腔麻醉（400mg/kg ）， 1本课题得到高等学校博士学科点专项科研基金（20040507004）的资助。 - 1 - 头顶备皮后将动物固定于脑立体定位仪（WDT- Ⅱ微电极推进器脑立体定位仪，国营西北光 学仪器厂）上，正中矢状切开头皮，剥离骨膜，调节门齿托的高度，使动物的前、后囟处于 同一水平。以前囟为坐标原点，向后 1.0mm，向右 4.0mm ，确定注射点坐标，用