NaCl+对三疣梭子蟹消化酶活力的影响.pdfVIP

NaCl 对三疣梭子蟹消化酶活力的影响 胡 毅，潘鲁青 （中国海洋大学 海水养殖教育部重点实验室，山东 青岛 266003 ） 摘要：作者采用酶学分析方法研究了反应介质中添加NaCl 对三疣梭子蟹 （Portunus tritubrculatus ）中肠腺 蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A 、羧肽酶B、淀粉酶活力的影响，反应介质中NaCl 浓度设 置为0、0.005、0.0 1、0.05、0.1、0.5、1.0 和2.0 mol/L 8 个梯度。实验结果表明，反应介质中添加NaCl 对消化酶活力影响显著，除羧肽酶B 外，添加NaCl 对三疣梭子蟹消化酶均有激活作用，且所有消化酶都 有很高的耐盐性。当反应介质中NaCl 浓度为0.1~0.5 mol/L 时蛋白酶活力最大；0.5 mol/L 时胰蛋白酶活力 最大；胰凝乳蛋白酶在反应介质中NaCl 浓度为1 mol/L 时酶活力最大；羧肽酶A 在反应介质中NaCl 浓 度为0.05~0.1 mol/L 时酶活力最大；NaCl 对羧肽酶B 有抑制作用，在反应介质中NaCl 浓度为2 mol/L 的 条件下，只有未添加NaCl 时酶活力的60% ；NaCl 在0~2 mol/L 时对淀粉酶均有激活作用，其最大激活能 力在0.5 mol/L 左右。 关键词：三疣梭子蟹 （Portunus tritubrculatus ）；消化酶；NaCl 中图分类号: Q175 文献标识码:A 文章编号: 1000-3096(2009)07-0051-06 海水是海洋动物赖以生存的环境，海水中含大 组织，剪开胃和肠，用预冷重蒸水 （0~4 ℃）将内 量的无机盐，其中钠和氯离子占有绝对优势，在盐 容物冲洗掉，用滤纸轻轻吸干水分，分别保存于低 度为 35 的海水中，钠和氯离子占了所有无机盐质 温 （80℃）冰箱中。 量的85.6%，盐度变化对海洋动物生理活动产生多 1.2 酶液的制备 ， [1 2] 方面的影响 。但有关盐度或NaCl 对海洋动物消 分别取湿质量50~ 100mg 左右的中肠腺、胃和 化酶活性影响的研究至今仍不多见。目前国内仅汤 肠，加入 10~ 15 倍体积(V/W)预冷重蒸水，在冰浴 [3] [4] 鸿 和陈品健 研究了环境盐度变化对海洋动物消 中匀浆10 min ，然后将匀浆液用Sigma 1-15K 型高 化酶活性的影响。NaCl 对体内消化酶直接影响的报 速冷冻离心机（0~ 1℃）以10 000 r/min 离心30 min ， 道大多集中在对淀粉酶的激活作用上，对其他消化 取上清液作为酶液，在0~4 ℃低温下保存，24 h 内 [5~7] 酶的研究尚不多见 。作者以三疣梭子蟹（Portunus 分析完毕。 tritubrculatus ）为材料，初步研究了反应介质中添加 1.3 酶活力测定 NaCl 对其消化酶活力的影响，探讨了NaCl 对三疣 NaCl 浓度设置为在缓冲液中加入NaCl ，使其 梭子蟹消化酶的影响机制，为三疣梭子蟹人工配合 反应液最终浓度分别为：0，0.005，0.01，0.05，0.1， 饲料合理配制提供科学依据。 0.5，1.0，2.0 mol/L 。然后在此条件下测三疣梭子蟹 1 材料和方法 中肠腺蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶 A 、羧肽酶B 、淀粉酶的活力。每个处理重复3 次， 1.1 实验材料 取平均值。 实验所用三疣梭子蟹购于青岛市南山水产品 市场，平均甲长为11.020