树qu免疫细胞体外感染Ⅰ型人免疫缺陷病毒实验的研究.pdfVIP

维普资讯 动 物 学 研 究 2001，Feb．22(1)：33一舯 CN53—1040／Q ISSN0254—5853 ZoologleatRtm areh 树购免疫细胞体外感染工型人免疫缺陷病毒的实验研究 张 立 责昆龙① (中国科学院昆明动物研究所 昆明 650223) 摘要 ：至今可以感染 I型人免疫缺胳病毒 (HIV一1)的动物只有黑猩猩和长臂猿，这严重阻碍了HIV一1的 疫苗研究和治疗研究。因此，寻找新的可以感染HIV一1的动物模型成为十分迫切的课题。已知树鼢对许多重要 的医学病毒易感，为了探讨树聃是否可以感染HIV一1，利用不同辅助受体的5种HIV．1病毒株，体外感染云南 野生成年树聃的琳巴细胞和单校／巨隧细胞 ；同时还用这些病毒感染人外周血琳巴细胞或单校细胞。然后用RT． PCR、PCR和流式细胞术分别进行检测。用RT-PCR方法未检测到感染上清中有病毒粒子的存在，用PCR法未 能发现树鼢的这些免疫细胞中有前病毒 DNA，用漉式细胞术也未能在这些感染 HIV一1的树聃细胞的表面检测到 特异抗原；而感染HIV一1的人免疫细胞均为阳性结果。实验结果表明树鼢的这些免疫细胞在体外未能感染上 HIV-1，可能的原因是树鼢的这些免疫细胞的HIV．1受体 (Cm )和辅助受体 (CCR5或 cxcr~4)与人的免疫细 胞差别较大。 关键词 ：HIV．1；动物模型；树鼢；PCR；流式细胞术 中图分类号：R392．12，R373 文献标识码：A 文章螭号：0254—5853(2001)01—0033—08 在现今的HIV．1动物模型中，只有黑猩猩和长 ． ， 1984)。树聃对多种重要的医学病毒易感，如 臂猿的免疫细胞可以体外和体 内感染上 HIV—l病 甲肝(詹美云等，1981)、乙肝(严瑞琪等，1989)、丙肝 毒。虽然黑猩猩是最理想的动物模型 (Conleyet (Xieeta1．，1998)和丁肝病毒(李奇芬等，1995)、轮 口f．，1996)，但 由于是濒危动物，体型特大，对饲 状病毒(万新邦等，1985)、疱疹病毒、基孔肯雅病毒 养和管理的要求很高，费用昂贵，不可能大量用于 (张海林等，1991)等。本文报告以不同的 HIV1病 实验研究 (黄海等，1997)。猕猴和狒狒等只能感 毒株体外感染树嗣免疫细胞的实验研究。 染与H1V．1有很大区别的 SIV。H1V．2(Barnettet 1 材料和方法 nf．，1994；Nathansoneta1．，1999)。所 以．寻找 适合 H1V．1研究的动物模型一直是病毒学家的迫切 1．1 实验动物 任务。 野生树聃来 自云南省昆明市郊，在实验动物房 树嗣 (Tupaa／bea／nger1)是一种分布于我国西 白{6I树嗣笼饲养，温度 20—28℃．湿度 50％～ 南部 (包括云南、四川西南部、西藏东南部、贵 70％，喂以饮水软化的小鼠饲料与水果，饲养 2周 州、广西和海南)和东南亚、南亚地区的小型哺乳 后用于实验。 动物，资源丰富，繁殖快，价廉 (王应祥，1987)， 1．2 病 毒 并具有许多独特的生物学特性 ，是某些生物医学研 所用的 5种 HIV．1病 毒均 由英 国 MRC的 究的重要动物模型 (贲 昆龙，1997)。与人类一样， NIBSC赠送，基本特性见表 1，其中HIV．1ⅢB用H9 树聃淋巴细胞可与绵羊红细胞形成玫瑰花结：同时 细胞扩增，其余4种病毒按MRC提供的流程 以人 也发现树嗣红细胞会与人和猴的T细胞发生特别 PBMC培养和增殖。 的粘附作用 (贲昆龙等，1985)，某些抗人CIM 分