抗菌肽CecropinB基因的克隆及体内活性检测方法的构建.pdfVIP

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2017-09-02 发布于重庆
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抗菌肽CecropinB基因的克隆及体内活性检测方法的构建.pdf

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浙江农业学报（）：， Acta Agriculturae Zhej iangensis 15 5 273 ～ 279 2003 抗菌肽 Cecrop in B 基因的克隆及体内活性检测方法的构建 1 1 1， 2 * 翁宏飚，牛宝龙，孟智启，徐孟奎 1 2 （浙江省农业科学院蚕桑研究所，浙江杭州 310021；浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310029 ）摘要：根据家蚕抗菌肽基因的序列设计引物，从家蚕蛹脂肪体中扩增家蚕 Cecrop in B 基因，并利用GST 融合表达系统进行表达。融合蛋白的表达量受表达诱导剂IPTG 浓度控制，利用融合蛋白对宿主菌的部分抑菌作用，建立灵敏、简便的家蚕 Cecrop in B 体内抗菌活性检测方法。关键词：抗菌肽；融合表达；；体内测活 E . coli 中图分类号：；文献标识码：文章编号：（） Q789 S881.2 A 1004 - 1524 2003 05 - 0273 - 07 Clone of antibacterial peptide Cecropin B gene and establishment of monitoring system for in vivo activi- 1 1 1， 2 1 ty analysis：，， *，（ WENG Hong-biao NIU Bao-long MENG Zhi-qi XU Meng-kui Sericultural Research Insti- 2 ，，，；， tute Zhej iang Academy of Agricultural Sciences Hangzhou 310021 China College of Animal Science Zhe- ，，） j iang University Hangzhou 310029 China ： Abstract Two specific primers were designed according to the reported cDNA sequence . Cecrop in B coding se- quence was obtained with RT-PCR method from induced fat body of silkworm pupae . The Cecrop in B gene was cloned into the fusion expression plasmid pGEX-4T-1. Expression of the GST-CecB fusion protein was controlled by the concentration of the transcriptional inducer IPTG . Thus the in vivo monitoring system for antibacterial ac- tivity analysis of the antimicrobial peptide Cecrop i