鱿鱼硫酸软骨素糖蛋白的分离纯化和鉴定.pdfVIP

第 9卷 第 4期 中 国 食 品 学 报 Vo1．9 No．4 2009 年 8月 JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnology Aug．20 09 鱿鱼硫酸软骨素糖蛋白的分离纯化和鉴定 方旭波 陈小娥 余 辉 宋 茹 (浙江海洋学院食 品与药学学院 浙江 舟 山 316004) 摘要 I1／的：研究鱿鱼软骨硫酸软骨素的主要成分。方法：以鱿鱼喉软骨为材料 。经提取、分离和纯化等步骤得 到一酸性粘 多糖组分C—S2；用高效凝胶过滤色谱和 比旋光度鉴定其纯度 ，并用化学和光谱法研 究其组成和结 构 。结果 ：C—S2为均一性较好 的粘 多糖 ，为硫酸软骨素 C糖蛋 白，其重均相对分子质量 (帆 )149595，比旋光 度一25-3。软骨素含量 95．31％，蛋白含量 2．59％，葡萄糖醛酸 (G1cA)含量 35．O2％。己糖胺含量 34．02％．总硫酸基 含量 9．54％，并存在少量中性单糖 ，由鼠李糖 (Rha)、甘露糖 (Man)、葡萄糖 (Glu)和半乳糖 (Ga1)组成 ：13～消去反 应说明C—S2中糖链 以0_糖肽键连接到苏氨酸上。结论 ：鱿鱼软骨硫酸软骨素的主要成分为硫酸软骨素C糖蛋 白。 关键词 鱿鱼 粘多糖 硫 酸软 骨素 分 离纯化 糖蛋 白 文章编号 1009—7848(2009)04—0103—07 鱿鱼又称柔鱼 、枪乌贼 ，属海洋无脊椎软体动 止血管硬化等活性 3】，因而引起食 品和医药界 的 物头足类 。广泛分布于大西洋 、印度洋及太平洋海 广泛兴趣。目前 ，有关鱼类软骨素的提取和分离研 域 。近 10年来 ，鱿鱼渔获量 占我 国总渔获量 的比 究主要集 中在鲨鱼和鳐鱼及其相关品种上 。对从 重随我国远洋鱿钓业的迅速发展而呈不断上升趋 鱿鱼喉软骨中提取和分离硫酸软骨素还鲜见研究 势 。浙江省是鱿鱼加工大省 ，鱿鱼产业在省渔业中 报道。因对疯牛病 的担忧，人们对牛皮、牛骨的软 占有重要地位。仅舟山市兴业公司一家企业 ，2007 骨素使用存在疑虑 。本文 以阿根廷鱿鱼 (illex02一 年鱿鱼的加工量就接近 l5万t。鱿鱼加工处理过 gentinus)加工副产物——鱿鱼喉软骨为原料 ，提 程 中会产生 15％一20％的鱿鱼脖 、裙边和碎 肉等副 取硫酸软骨素制品，并对其化学组成和结构进行 产物。这些副产物主要是经冷冻外运 ，作为鱼粉或 分析 ，旨在为其在功能性食 品、生物医药及其它相 饲料的原料，销售价格很低 。此外，还有部分副产 关领域的应用提供基础数据。 物被当作废物随意丢弃 ，造成渔业资源的极大浪 费。一些最有价值 、含量较高的功能活性成分被人 1 材料与方法 们所忽视 ，未得到合理的开发和高值化利用。 1．1 试验材料 硫酸软骨素 (Chondroitinsulfate．简称 Chs)是 阿根廷鱿鱼喉软骨 (约占鱿鱼脖的5％)由浙 一 种天然酸性粘多糖 (mucopolysaccharide)，由D一 江兴业集 团有 限公司提供。 葡萄糖醛酸和氨基己糖交替连结而成，属生物高 胰蛋 白酶 ，购于上海生化试剂厂 ：木瓜蛋 白 分子化合物 ，广泛存在于人和一些动物 ，如猪、牛、 酶 ，购于上海源聚生物科技有限公司：琼脂糖凝 羊 、鱼等软骨组织中，且通过共价键与核心蛋 白相 胶快流速离子交换层析和葡 聚糖 T系列 ，购于 结合 。据报道 ，鱼类软骨 中所含的硫酸软骨素具有 Pharmacia公司；标准单糖 、葡萄糖醛酸 、牛血清 白 促进冠状动脉循环 、降血脂 、抗凝血 、抗肿瘤和 防 蛋白、问苯三酚 、明胶 、盐酸氨基葡萄糖 、Chs—C(硫