传染性法氏囊病病毒多表位模拟肽串联基因的表达与免疫原性分析.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # #$# #$’ 年 月 日 $%% $ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! ()*+,-+. $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 传染性法氏囊病病毒多表位模拟肽串联基因的表达与免疫原性分析 # $ # / # 王永山 ，范红结 ，张晓民 ，李 银 ，肖焕娟 # （南京军区军事医学研究所 南京军区疾病预防控制中心 南京 $#%%%$ ） $ / （南京农业大学动物医学院 南京 $#%%2’ ）（江苏省农业科学院兽医研究所 南京 $#%%#! ） 摘 要：用 株传染性法氏囊病病毒（ ）单克隆抗体（ ）从噬菌体随机肽库中得到了 个含有不同 抗原 ’ F0GH ;I* ’ F0GH 表位的模拟肽序列。在此基础上，将 个抗原表位用 四肽连接构建多表位基因 。将该基因合成、克隆 ’ JJJK ’)LA 后，构建原核表达质粒 ，在大肠杆菌中表达重组多表位蛋白 ，经 分析， 占菌体总蛋 L:58’)LA +’:MFK KGK8MIJ: +’:MFK 白的 、分子量 。用 单克隆抗体和多克隆抗体对 进行免疫印迹对比分析，结果表明， 具 #’ N #%OG- F0GH +’:MFK +’:MFK 有 特异性和免疫反应性。将 经皮下注射免疫兔， 只次，免疫 次，间隔 ，用 间接 F0GH +’:MFK !%% ?P P $ Q F0GH :RFKI ! 检测血清抗体，第一次免疫 后抗体效价为 ，第二次免疫 后抗体效价升高到 ，说明 可诱 Q #S!%%% #!Q #S$’3%%% +’:MFK 导机体产生 特异性抗体。用 加免疫佐剂经肌肉注射免疫鸡， 只次，免疫 次后，血清抗体效价可 F0GH +’:MFK