CPn感染对小鼠主动脉斑块面积及CD40、CD40L表达水平的影响及黄芩苷的干预作用.pdfVIP

CPn 感染对小鼠主动脉斑块面积及CD40、CD40L 表达水平的影响及黄芩苷的干预作用1 1 1 1 2 1 1 刘煜德 ，吴伟 ，王嵩 ，邝枣园 ，李荣 ，黄衍寿 （指导） 1 广州中医药大学第一附属医院，广东广州（510405 ） 2 广州中医药大学，广东广州（510405 ） 摘 要：【目的】探讨肺炎衣原体（CPn ）感染对小鼠主动脉粥样硬化（AS ）斑块面积指数（PAI ） 及 CD40 、CD40L 表达强度的影响及黄芩苷的干预作用。【方法】小鼠随机分为黄芩苷高剂 量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、模型组、正常对照组。喂饲高胆固醇饲料 1 周后，经 一侧鼻腔吸入含CPn 的培养液，每周1 次，共3 次。最后一次接种5 天后开始给药至实验 结束，第 1 次接种后第 18 周处死全部动物。【结果】黄芩苷高、低剂量及阿奇霉素组 PAI 均较高胆固醇+CPn 感染组明显减小(p0.05) ，高胆固醇组、高胆固醇+CPn 感染组及三个治 疗组主动脉CD40、CD40L 表达强度均较正常组显著增高(p0.01) ，阿奇霉素组CD40L 表达 强度较高胆固醇+CPn 感染组降低(p0.01)。【结论】早期应用黄芩苷或阿齐霉素治疗，有助 于减轻高胆固醇饮食+CPn 感染所致小鼠主动脉粥样硬化斑块损害程度。 关键词：肺炎衣原体，脉粥样硬化，黄芩苷，斑块面积指数，CD40 ，CD40L 多数临床试验结果表明抗生素并不能有效减少心脏事件的发生率[1]，但临床试验的结果 只能说明抗生素治疗不能逆转已形成的AS损害，不能否定感染在AS发病过程中的可能作 用。多数的动物实验表明[2-5] ，CPn参与了AS 的发病，早期予抗生素治疗可减轻AS损害。我 们的前期研究表明[7]，CPn感染可复制新西兰兔AS模型，黄连解毒汤复方可抑制CPn感染所 致的炎症反应。为进一步探讨CPn感染对动脉粥样硬化斑块面积和CD40 、CD40L表达强度 的影响，以及清热解毒中药黄芩有效成份黄芩苷的干预作用，我们以C57BL/6J小鼠为研究 对象进行了研究，现将结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 主要仪器、试剂 切片机 Leica RM 2025 ，漂烘处理仪 ZMN-6802 ，包埋机 Leica EG 1 140H ，脱水机 Leica TP 1020 ，显微镜 Olympus BX50，北航图像中心病理图文管理系统4.0 。CD40 makers ，美 国LAB VISION 公司生产，批号：9238P401A; CD154 （CD40L ） (purified anti-mouse CD154) ， 加拿大Biolegend 公司生产，批号：B102380 。 1.2 细胞株和药物 肺炎衣原体AR-39 购自美国华盛顿大学；黄芩苷由四川广汉市维康植化有限公司生产， 含量90.8% ；阿奇酶素由丽珠集团制药厂生产，批号040904 。 1.3 实验动物和饲料 雄性C57BL/6J 小鼠，8 周龄，SPF 级，由第一军医大学实验动物中心提供，许可证号： 2002-009 2003B029 2003A075,小鼠饲养于广州中医药大学第一附属医院清洁级动物房（粤监 证字 2004C0 19 号）。小鼠随机分为黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、高胆 固醇+CPn 感染组、高胆固醇组、CPn 感染组、正常对照组，其中CPn 感染组和正常对照组 1本课题得到国家自然科学基金资助课题（编号的资助。 -1- 喂普通饲料和水；黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、高胆固醇+CPn 感染组、 高胆固醇组喂高胆固醇饲料，正常饮水。高胆固醇饲料含2 ％胆固醇，10％猪油，0.5 ％胆酸 钠，其他各成分按标准饲料配方，由广东省实验动物中心配制。 1.4 CPn 感染模型的制作 黄芩苷高剂量组、黄芩苷低剂量组、阿奇霉素组、高胆固醇+CPn感染组喂饲高胆固醇 饲料 1 周后，