TRPV1对LPS致热大鼠体温及下丘脑中Ca2+和cAMP含量的影响.pdfVIP

TRPV1 对LPS 致热大鼠体温及下丘脑中Ca2+和 cAMP 含量的影响1 王乐，王兰兰，曹宇* 中国医科大学基础医学院生理学教研室，沈阳（110001 ） E-mail ：rachel-8228@163.com ，caoy@ 摘 要：目的：探讨TRPV1 在脂多糖（LPS ）致大鼠发热过程中的作用和机制。方法：48 只雄性SD 大鼠随机分为四组，正常对照组（N ）、Capsazepine 组（CPZ ）、LPS 组（LPS ） 和Capsazepine+ LPS 组（CPZ+LPS ）。连续观察体温变化；在发热高峰断头，以Fura-2/AM 为荧光指示剂，测定下丘脑细胞内[Ca2+] ；应用放射免疫法检测下丘脑中cAMP 含量的变化。 i 结果：⑴各组体温变化最大值（∆Tmax ）由高至低顺序为：CPZ+LPS 组LPS 组CPZ 组N 组；其中，CPZ+LPS 组与LPS 组比较，∆T （300 ～480 min 期间）及体温反应指数TRI8 均 呈显著性增高（P 0.01 ）；⑵在发热高峰期，CPZ+LPS 组[Ca2+] 明显低于其它三组（P 0.01 ） i (3)而CPZ+LPS 组cAMP 含量与其它组比较显著增多（P 0.01 ）。结论： Capsazepine 可能 通过阻断下丘脑TRPV1 通道，改变细胞内钙离子浓度，进而影响脂多糖性发热过程。 关键词：脂多糖；发热；TRPV1；Capsazepine；cAMP；[Ca2+]i 中国图书分类号：R339.5;R364.6;R441.3 文献标识码：A 体温调节的重要中枢位于视前区下丘脑前部(preoptic anterior hypothalamus,PO/AH),该 区含有温度敏感神经元，对来自外周和中枢温度信息起整合作用。辣椒素受体又称为香草酸 受体（transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1) ，是非选择性阳离子通道，主要引起 Ca2+ o [1] 流动，在离体实验条件下可被多种理化因素激活，主要有辣椒素，大于 43 C 的热和质子 。 在下丘脑，基底神经节等处发现 TRPV1mRNA 存在[2]，在离体的外周神经中证实，只有热 刺激达到 43oC 时 TRPV1 才能被激活，但是在整体发热条件下，炎性介质会降低激活该通道 的温度阈值[3] 。我们推测下丘脑中的 TRPV1 可能参与发热时的体温调节，但该通道被激活 后引起细胞内钙离子浓度如何变化，这种变化对发热过程有何影响还不清楚。 我们通过应用外源性致热原-脂多糖（lipopolysaccharide, LPS ）复制大鼠发热模型，结 合使用 TRPV1 通道的拮抗剂 Capsazepine[4] ，观察各种实验条件下体温的变化、下丘脑神 经细胞内[Ca2+] ，以及与中枢发热介质 cAMP 含量变化的关系，探讨 TRPV1 对脂多糖 i 性发热过程的影响。 1 材料和方法 1.1 实验动物处理及分组 选用健康雄性 SD 大鼠，体重 250-280g ，体温(38.1+0.2)℃, 由中国医科大学实验动物中 心提供，室温(20+2) ℃，相对湿度 40%-60% ，昼夜光照节律 12h:12h，单笼饲养，自由进食 水。实验中所用耐高温干热物品均干热 180℃，2h 。不宜干热物品采用高压蒸汽灭菌。各项 操作按常规无菌操作规则进行。 将动物随机分为 4 组，每组 12 只，共 48 只。（1）正常对照组（N 组）：侧脑室注射 溶剂 10µl （10%无水乙醇＋10%Tween80+80%生理