五个绵羊品种的微卫星位点多样性分析.pdfVIP

第 31卷 第 l期 家畜生态学报 Vo1．3lNO．1 2010年 1月 ActaEcologiaeAnimalisDomastici Jan．2010 五个绵羊品种的微卫星位点多样性分析 曾检华 。，曹少先h，舒邓群 ，宋宏绣。，刘铁铮 (1．江苏省农业科学 院畜牧研究所 ，江苏 南京 210014；2．江西农业大学动物科技学院，江西 南昌 330045； 3．南京中医药大学中医药研究院，江苏 南京 210029) [摘 要] 利用微卫星标记技术分析 了湖羊、小尾寒羊、杜泊羊、特克塞尔羊和无角陶塞特羊 5个品种的遗传 多样性及其亲缘关系。结果表明：16个微卫星位点为高度或 中度 多态位点，各 绵羊品种 内的多态信息含 量平均值 为 0．4569～0．7477；5个品种 的平均 杂合度在 0．3500～ 0．4313之 间。UPGMA聚类结果表 明2个地方品种和 3个引进品种 的遗传距 离较远 ，特别是 与杜泊羊的遗传距 离较远，提示湖羊和杜泊羊、小尾寒羊和杜泊羊的杂交组合更具优 势。 [关键词] 绵羊；微卫星；杂种优势 [中图分类号] $811．5 Esr献标识码] A [文章编号] 1004—5228(2010)01—0025—05 微卫 星 (Microsatellite)又称 为简单 序列重 复 (Texel，9只)、陶塞特 (Dorset，17只)采 自江苏省苏 (ShortSequenceRepeat，SSR)，以 2～6bp的短核 州市种羊场，小尾寒羊 (Small—tailedhan，10只)、杜 苷酸为基本单位 ，呈 串联重复状广布于生物体整个 泊羊 (Dorper，10只)采 自江苏省镇江农科所 。 基 因组，平均每 10kb就出现一个 。因其在基 因组 1．1．2 微卫星引物 本试验所用的 16对微卫星引 中数量多 、分布广 、多态性丰富 、易于检测 、呈共显性 物来 源 于 Australian SheepGeneMappingWeb 遗传进化 、所受选择压力小等优点，在度量遗传多样 Site(http：／／rubens．its．unimelb．edu．au／～jillm／ 性 、估测品种问遗传距离及构建系统发生树等研究 jil1．htm)，由上海英骏生物技术 有 限公 司 (Invitro— 中显示 出巨大的优势[1。]。 gen)合成。 近年来 ，我 国先后从 国外引进了许多优 良肉用 1．2 方法 绵羊品种 ，杂交改 良我国的本地绵羊，分析引进绵羊 1．2．1 DNA提 取与 PCR扩增 基 因组 DNA 提 品种与地方品种的遗传多样性及其亲缘关系 ，对于 取采用常规的酚、氯抽提法。PCR反应体系为 2O 种质资源保护 以及充分利用杂种优势都具有重要的 I：10×缓冲液 2 L，MgC12(25mmol／L)l～1．6 指导意义 [4j。为此 ，本研究利用 16个微卫星座位对 L，弓l物 (10mol／L)各 0．6 L，dNTPs(10mmol／ 3个引进绵羊品种和 2个地方品种进行了微卫星多 L)0．4 “L，Taq酶 (5U／uL)0．2,／L，模板 DNA 15～ 态性检测 ，分析各 品种的遗传 多样性 以及各品种问 30ng，补充双蒸水至 20 L。PCR扩增反应程序 的亲缘关系。 为 ：94℃预变性 5rain，94℃变性 30S，52～66℃退 火 30S，72℃延伸 30S，经 3O个循环 ，于 72℃延伸 1 材料与方法