TNFAIP1基因通过抑制Bcl-2的表达诱导细胞凋亡.pdfVIP

2009年3月 湖南师范大学 自然科学学报 V01．32 No．1 第32卷 第 1期 JournalofNaturalScienceofHunanNormalUniversity Ma／．．2oo9 TNFAIP1基因通过抑制 Bcl-2的表达诱导细胞凋亡 孙振华，贺琼芝，颜 峰，周 畅 (湖南师范大学生命科学学院；教育部蛋白质化学与发育生物学重点实验室，中国长沙 410081) 摘 要 将TNFAIP1基因成功克隆到真核表达载体pCMV—Myc中，研究TNFAIP1基因诱导细胞凋亡的机制． Hochest33258和流式细胞计数实验发现，过表达TNFAIP1能够诱导 HeLa细胞凋亡．通过对凋亡相关基因的研究， 发现过表达TNFAIP1能够抑制Bcl-2的mRNA水平和蛋白表达，推测TNFAIP1基因可能通过抑制Bc12的表达诱 导细胞凋亡． 关键词 TNFAIP1；Bel-2；细胞凋亡 中图分类号 Q78 文献标识码 A 文章编号 1000—2537(2009)01-0112-04 TNFAIPIInducesCellApoptosisbyInhibitingExpressionofBcl-2 SUNZhen-hua，HEQiong—zhi，YANFeng，ZHOUChang (KeyLaboratoryofProteinChemistryandDevelopmentalBiologyofMinistryofEducation， CollegeofLifeScience，HunanNormalUniversity，Changsha410081，China) Abstract Tostudythemechanism ofTNFAIP1inducescellapoptosis．TNFAIP1iSclonedintopCMV—Myc． HeLacellsapoptosisareobservedusingHoehest33258 stainingandflow cytometryanalysis．Furtherstudiesare takenforhtemechanism ofoverexpressingTNFAIP1inducescellapoptosis．RT—PCRandwesternblotanalysisindi— catethatTNFAIP1could inhibitthemRNA and protein levelofBcl-2．Thoseresultselucidateamechanism by whichoverexpressingTNFAIP1inducescellapoptosis． Keywords TNFAIP1；Bcl-2：cellapoptosis 人类 TNFAIP1基因是一种高保守的单拷贝基因，定位于人类 17号染色体的q22～q23区域，是PDIP1 基因家族的一个成员…．TNFAIP1是第 1个被确定为受肿瘤坏死因子 诱导的蛋 白，它同时也受 白介素 6 诱导_2J．人TNFAIP1基因的氨基酸序列与同一家族 的PDIP1和 KCTD10高度同源 ，这3个蛋 白不但在氨基 酸序列上享有高度相似性，而且在结构上也十分保守 ．在大鼠的实验中发现TNFAIP1能和PCNA以及 DNA聚合酶6同时相互作用，并且在PCNA存在的条件下激活 DNA聚合酶的活性 ．所以TNFAIP1蛋白 极有可能通过与DNA聚合酶 8的相互作用，从而在DNA合成或细胞凋亡的过程中扮演重要的角色．TN— FAIP1在正常细胞系中表达较高，而在癌细胞系中表达较低 J，推测TNFAIP1可能对于维持细胞的生长是 必须的，可能癌细胞中的一些因子抑制了该基因的表达 ，从而在癌症的发生中起到一定的作用．这些实验说 明了TNFAIP1在细胞生长、凋亡和人类疾病中起到重要的作用．目前对该基因确切的功能和机制研究的报 道很少．本文中将对TNFAIP1是否能诱导细胞凋亡和其机制进行研究． 细胞凋亡是生物体内一种 自发、主动的细胞死亡过程，是生物体维持细胞数量相对稳定的重要环节．有 很多基因在细胞凋亡中起作用，例如：B