酶联免疫吸附试验检测体液中细胞因子的影响因素.pdfVIP

维普资讯 柃验医学2006{I=第|21卷增刊 LaboratoryMedicine2006Vol21．SupDelment · 4l · 文意编号：1001—20879(2006)t~1-]：I1—0041—02 中图分类号：R446．61 文献标识码：A 酶联免疫吸附试验检测体液中细胞因子的影响因素 章谷生 (长江免疫基·因检验中心，上海 200060) 关键词：酶联免疫吸附试验；细胞因了；影响因素 健康人体液中细胞因子含量极低，若出现较 二、源于细胞因r小身特性的影响 高量时，常与机体细胞免疫失衡或患者病情及治 体液中有些细胞 子分子存在多样化的结构， 疗等情况有关，现今医院检验科已丌展这方面的 如有前体、单体、共聚体，也有与细胞膜结合的。如 工作，有的也列入常规项 目。细胞囚子测定的方法 成熟型广]细胞介豢 (IL)．1a(相对分 f质量 l7000) 有好几种，其中酶联免疫吸附试验 (enzyme—linked 是其前体物 (相对分 _f质量31000)蚩白的分解产 immunosorbentassay，ELISA)以 快速、特异性强、 物，IL一1包括 3个氨基般序列高度f刊源的蛋白质： 精确性高和不受体液中药物的干扰等优点而得到 IL．1a、IL．1B和 IL．1Y，其 巾IL．1Y足 IL一1[内 广泛的应用。为能给临床提供可靠的信息，在选用 拮抗剂，它与特异性 IL．1受体结合向不传导信息。 优质的试剂盒和严格遵守试验操作程序的萆础上， 如受检体液中存在IL一1Y，并不干扰ELISA结果， 强调 视影响试验本身的因素。许多因素赋予细胞 可影响生物学的活性检测，以致 2种试验可出现不 因子定量检测的复杂性，而且每一具有普遍意义的 同的结果。 规律，也都存在着例外。如多次发现试验结果例外 体液中还存 一些可溶性 胞 子受体，它 或与临床明显不符，甚至反常时，深入分析和探讨 们是膜受体蛋广]分解的产物，通常叮抑制细胞 于 这些例外现象，不仅加深对该试验的认识和体会， 的生物活性，如肿瘤坏死因子 a(TNF—a)和 IL—l 或许还可为不断改进这类试验的研究提供各种线 等，而可溶性 IL一6gp80却足 IL一6的催动剂，它能 索。现从5个方面绍介ELISA检测体液中细胞因 使IL．6／IL一6受体复合物与细胞表面的gpl30结合。 子的影响因素。 但所有可溶性细胞因 。受体都是 扰细胞 子免 一 、 源于试验本身局限性的影响 疫检测的潜在根源。 ELISA与其他检测体液中细胞因子的方法一 体内细胞分泌的细胞因-r存体液中仪能维持 样，其基本原理足抗原与抗体反应，它只能检出具 几天，且细胞 子的半哀期很短，仃的细胞 子的 有特异抗原性的细胞因子，当细胞因了在某种情况 半衰期10min，有的细胞因子 体内的含。帚：显 下失去活性时，ELISA仍可检出，但所得结果就 示生理性节律，如类风湿性关节炎患者在甲．体 难以反映临床实际情况。而临床医生是以细胞因子 IL一6水平出现高峰。 的牛物学效应来分析临床现象，所以与生物学技术 三、源于受检体液中存在其他蛋 白质的影响 检测相比，ELISA测得的结果有时会与患者病情 人血浆蛋广1质对细胞因子的检测来说，是非 的表现不相一致，甚军棚互矛盾。 特异性抑制剂，特别是含 a 巨球蛋门，丰=而它与 免疫细胞以自分泌和旁分泌方式在其局部发 一 些细胞因孑结‘合的亲和力很低，一般将受检样小 挥作用