HPV18E7抗原HLA_A2限制性CTL表位的初步筛选.pdfVIP

第3 7 卷第2 期 温 州 医 学 院 学 报 Vol.37 No.2 第2 3070 7卷年3 月 Journ温al o州f We医nzh学ou M院ed学ical报College Mar第.2 0207期 ·论 著 · HPV18E7抗原HLA-A2限制性CTL表位的初步筛选 1 1 2 1 1 张乾 ，郑飞云 ，徐云升 ，欧荣英 ，余剑琴 (温州医学院第一附属医院,浙江 温州 325000，1.妇产科;2.皮肤科) [摘　要]目的:初步筛选人乳头瘤病毒18型E7抗原的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞 （Cytotoxic T lymphocyte，CTL）表位，为表位免疫原性鉴定提供靶肽。方法:采用超基序、多项式和量化基序方案相结 合的方法，对靶抗原HPV18E7的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位进行预测，并应用固相合成法合成 多肽，经RP-HPLC纯化及纯度分析，用质谱进行定性鉴定。结果:分别预测出5条、1条和6条九肽表位，综 合三种预测方案确定其中1条为候选合成表位，合成肽的纯度大于95%，经质谱分析合成肽的分子量测定值 与理论值相符。结论:超基序、多项式和量化基序方案联合应用提高预测效率，避免了在研究HPV18E7抗原 表位时盲目合成多肽；所合成的多肽为高纯度靶肽，为后继的抗原表位的免疫原性的鉴定奠定了实验基础。 [关键词] 乳头瘤病毒；表位；淋巴细胞；E7抗原；固相合成；基序 [中图分类号]　R392.11[文献标识码]　A [文章编号]　1000-2138(2007)02-0100-04 18E7 antigen Gynaecology, Abstract:Objective:To screen the HLA-A2- antigen, and to identifythe predicted HLA-A2- genicity identification.Methods: the peptide was detected by reverse- -HPLC). Results: to its theoretical value.Conclusions: tative immunogenicity identification in future. Key words: [3] 宫颈癌为妇女最常见的的恶性肿瘤之一，其死 白，具有良好的免疫原性 ，因此对HPV18E7抗原的 [1] 亡率位于全球妇女癌症死亡率的第二位 ，而人乳 细胞毒性T淋巴细胞 （ 头瘤病毒（Human papillomavirus,HPV）感染是宫 CTL）表位进行预测，在国内外相关研究基础上筛选 颈癌发生的首要因素和中心环节，用PCR技术检测 表位、进行表位修饰和研制针对HPV18感染治疗性 [2] 能在大于95%宫颈癌标本中检出HPV DNA。目前在 多肽疫苗具有重要的意义。E7抗原的CTL表位可以 宫颈癌治疗中虽然采用了手术、放疗和化疗等综合 被HLA-A2、HLA-A3等分子提呈，而我国HLA-A2阳性 [4] 治疗，但疗效仍然不够满意，且毒副作用较大，迫 人群比例高达53%左右 ，故HPV18E7抗原的HLA-A2 切需要寻找一种有效清除HPV的方法以防止宫颈癌 限制性CTL表位的研究颇具代表性。 的发生。HPV早期抗原E7是HPV相关肿