α2羟基酸在不同的手性配体交换色谱固定相上分离性能的考察.pdfVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究报告 第 6 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2003 年 6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 650～654 α 羟基酸在不同的手性配体交换色谱固定相上分离性能的考察 祝馨怡　陈立仁　柳春辉　李永民 ( 中国科学院兰州化学物理研究所 ,兰州 730000) α 摘　要 　合成了 L羟基脯氨酸 ,L脯氨酸 ,L苯丙氨酸 3 种硅胶键合手性配体交换色谱固定相 ,并用于 羟 基酸的直接光学分离 ,取得了较为满意的结果。对不同的手性配体交换色谱固定相的分离性能进行了比较 , 并详细考察了流动相pH 值、金属离子浓度、柱温等因素对分离效果的影响 ,从而进一步优化了色谱分离条 件。 α 关键词 　羟基酸 ,手性固定相 ,对映体分离 ,配体交换色谱 1 　引　　言 α α 羟基酸是 氨基酸的天然类似物 ,它参与生物体的许多重要的生理活动 ,在医药工业中也有着广 1 α 泛的应用 。但是它的生理活性却与其绝对构型严格对应。因此 ,拆分 羟基酸以得到其单一的对映 体构型以及测定其对映体纯度 ,近年来引起了人们的广泛关注。目前采用的物理法、化学法以及酶法等 光学法拆分的缺陷是效率低 ,需多次重复操作制备 ,且所用的手性试剂及酶制剂一般难以得到 ,不便回 收及反复使用2 。采用通常的气相色谱和液相色谱法拆分 ,一般需要柱前样品衍生化。衍生化过程不 仅费时麻烦 ,而且有可能使分析物质发生消旋 ,影响分析结果3 。到目前为止 ,手性配体交换色谱法是 α 直接分离 羟基酸的最简便有效且应用最为广泛的一种分离手段 ,它与传统的方法相比具有选择性高、 无需进行柱前衍生化、流动相多采用水及对环境无污染等优势。 配体交换色谱技术是 1961 年由 Helfferich 首次提出的 ,并通过 Rogozhin 和 Davankov 等人的进一步发 展 ,使其成为一种有效的手性色谱分离法。手性配体交换色谱的分离机制是配位交换4 ,分离过程如下 式所示 : CL n M + L CS CL n - 1 M L CS + CL ( n ≥2) ( 1) CL n M + DCS CL n - 1 M DCS + CL ( n ≥2) (2) ( ) ( ) ( ) ( ) 在配体交换色谱中 ,手性配体 CL 与金属离子 M 形成络合物 CL n M 并与对映体 CS 发生交换 作用 ,对映体 D和 L 型与手性配体固定相所形成的络合物稳定性不同 , K ≠K ,决定了它们在洗脱液 1 2 作用下的保留时间或保留体积也不同 ,越稳定者 ,其保留时间越长 ,后洗脱 , 因而可以进行 DL 对映异构 体的拆分。 5 6 以树脂 或硅胶 为载体 , 以氨基酸及其衍生物为手性选择子的手性配体交换色谱固定相已成功 α 地应用于 氨基酸的分离 ;另一方面 ,采用氨