TNFα对大鼠肺微血管内皮细胞NO的产生及NOSmRNA表达的影响.pdfVIP

维普资讯 落 压甜 大学学握 4 JShanghaiMedUrfiv 4．7 TNFa对大 鼠肺微血管 内皮细胞 NO的 产生及 NOSmRNA表达 的影晌* 幻唧2 刘清行 金惠钻 (上海医科大学基础云 磊i 面孚；E奢睦 上海 200032) 目的 阐明肿瘤坏死因子 a(TNF)对 内皮细胞一氧化氨(NO)的产生及两型一氧化氮合酶 (NO~)mRNA表达 的影响及其规律。方法 以大 鼠肺微血管 内皮细胞为材料 ，测 定细胞培养上清液 中NO2水平并应用定量 RT／ PCR技术检测内皮细胞 NOSmRNA表达水平。结果 应用 TNFa(1o0Tlg^T11)作用于内皮细胞 6h后 ，发现培养上 清液 NO2水平较对照组显著升高 (尸0．05)，而 6h以内两组无显著差别 (PO05)。预先应用L—NMMA、地塞 米松、放线苗酮均可阻断 TNh 诱导 的NO2一水平的升高．而应用 L一精氨酸则可进一步升高 NO2水平。定量 RT—PCR结果发现 ， (100~_g／m1)作用 24h后，大鼠肺微血管 内皮细胞诱导型 NOS(INOS)mRNA水平较对照 组明显增高，而预先应用地塞米松或放线菌酮后 ，iNOSmRNA水平与对照组无明显差异 (P005)，同时 内皮型 N0s(d螂 )mRNA水平较对照组显著降低 ，这种下调作用可被放线苗酮阻断，但不被地塞米松阻断。结论 ① TNFa可诱导大 鼠肺微血管 内皮细胞 iNOSmRNA表达而抑制 e0SmRNA表达 ，此过程有新合成的蛋 白质因子参 与；②TNFa对 内皮细胞中两型 NOS具有不 同的基因调控机制 ；③较高剂量 1T 可时间依赖性地诱导大鼠肺微血 管内皮细胞 NO的生成，提示 NO在病理及生理状态下微血管的调节 中具有重要意义。 关键词 壁塑 丕旦王 空星塑望i=! =墨垡 曼曼 中国圈书资料分粪法分粪号 R363272 EffectsofTNFaonProductionofNO andNOSmRNA ExpressioninRat PulmonaryM icrovascularEndothelialCells LiuQinghang，JinHuiming (Departm~ortt0厂 如 m) ，School B疵 Medial＆妇 ， 增k MedicalUniversity，s 增kz200032) ④ ㈣，a一 PIl Toduddetetheregulationofindudbleandconstitutivenitricoxidesynthasegeneinendothelial cellsbyTNFct． Methods nlemethodofratpulmonalymicrovascularendothelialcell(RPMEC)cul